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(Ap5A) a los gránulos pudo ser inhibido por otros Javier Gualix et al.
diadenosina polifosfato (como el diadenosina trifosfato,
Ap3A, o el diadenosina tetrafosfato, Ap4A) así como por análogos de nucleótido en el transporte de los diadenosina
los análogos no hidrolizables de ATP y ADP, adenosina polifosfato sugiere que ambos tipos de sustancias, mono- y
dinucleótidos de adenina, comparten un transportador
5’-O-(3-tio-trifosfato) (ATP?S) y adenosina 5’-O-(2-tio- vesicular común (88) (Figura 4).
difosfato) (ADPßS). El patrón inhibitorio de estos
ATP ADP AMP
GTP UTP
e-ATP ApnA
Figura 4. Estructura de los principales sustratos utilizados en la caracterización del transportador vesicular de nucleótidos.
También se han llevado a cabo ensayos del transporte proceso de difusión no saturable en estos gránulos
de nucleótidos en gránulos cromafines “ghosts”. Estos “ghosts”, si bien la inhibición parcial del transporte de
“ghosts” son gránulos desprovistos de su contenido, por ATP por atractilósido y por sustancias que inhiben la
lisis osmótica, y después resellados. Se obtienen así ATPasa o disipan el gradiente de protones a través de la
vesículas con los mismos componentes de membrana que membrana, pondrían también de manifiesto la existencia,
los gránulos pero sin su contenido soluble. Estas en estos gránulos “ghosts”, de un sistema de transporte
preparaciones presentan la desventaja de que solo una activo. Sin embargo, la alta contribución de la difusión
pequeña proporción de las membranas obtenidas por el enmascararía la saturabilidad de este proceso (92). Estos
choque osmótico se resellan correctamente (89). Sin resultados fueron puestos en entredicho tras la aparición de
embargo, permiten el control del medio intragranular un trabajo que claramente describía la acumulación de
requerido para algunos estudios de la biofísica del ATP en estos orgánulos mediante un sistema de transporte
transporte y han sido ampliamente utilizados para la dependiente de la actividad de la ATPasa granular (93). Al
caracterización del transporte de catecolaminas a los igual que ocurría con el transporte a gránulos intactos, el
gránulos cromafines (90). El empleo de estos “ghosts” transporte a “ghosts” depende de la diferencia de potencial
permitiría el estudio del transporte vesicular de nucleótidos entre ambos lados de la membrana, como pone de
sin las posibles modificaciones introducidas por un manifiesto el que el transporte sea inhibido por tiocianato
hipotético intercambio de fosfato entre los nucleótidos pero no por el ion amonio. Otras características comunes
intragranulares. En un primer estudio del transporte de con el mecanismo de transporte ya descrito en vesículas
nucleótidos empleando estas vesículas (91), se describió la intactas serían la inhibición por atractilósido, así como la
existencia de un proceso de transporte por difusión, no falta de especificidad, puesto que GTP y UTP pueden ser
saturable, independiente de Mg2+ y no inhibido por ADP. también transportados a los gránulos “ghosts”.
Posteriores trabajos incidieron en la existencia de un
Los ensayos con gránulos “ghosts” aportaron datos
22 @Real Academia Nacional de Farmacia. Spain
