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Alicia Rodríguez Gascón, M.ª Ángeles Solinís Aspiazu, Ana del Pozo Rodríguez

caveolas a endocitosis mediada por clatrinas. Si tenemos recoge una fotografía de los vectores preparados con
en cuenta que la endocitosis mediada por clatrinas conduce dextrano y protamina obtenida por microscopía electrónica
el vector hacia los lisosomas, podemos deducir que es la de transmisión.
actividad lisosomal la que favorecería la liberación del
ADN de las SLNs, donde se encuentra fuertemente unido Figura 6. Fotografía de vectores preparados con
debido a la alta capacidad de condensación de la dextrano:protamina:ADN:SLNs obtenida por microcopía
protamina. La falta de actividad lisosomal de la vía electrónica de transmisión.
caveolar justifica la disminución de la eficacia transfección
de las células HEK293 a medida que aumenta la Los estudios de transfección mostraron que la
proporción de protamina en el vector. El efecto de la presencia de dextrano en las nanopartículas incrementaba
protamina disminuyendo la eficacia de transfección de los significativamente la eficacia de transfección en ARPE-19.
vectores en células HEK293 revela que la introducción en En la figura 7 se recoge la eficacia de transfección de
la formulación de algún componente para salvar uno de los células ARPE-19 tratadas con vectores preparados con
pasos limitantes del proceso de transfección no siempre SLNs, protamina y dextrano.
asegura un incremento en la eficacia porque puede suceder
que otro de los pasos del proceso de transfección se vea
perjudicado. Estos resultados ponen de manifiesto la
importancia de la evaluación de los mecanismos de
internalización y disposición intracelular de los vectores
para optimizar la formulación, teniendo en cuenta además
la célula diana que se pretende transfectar.

5.3. Utilización de polisacáridos

5.3.a. Dextrano

Otra opción para incrementar la eficacia de las SLNs es
incorporar en la formulación polisacáridos aniónicos. Una
vez conocido el efecto de la protamina sobre la eficacia de
transfección y su relación con la actividad lisosomal,
incorporamos dextrano en las SLNs debido a que favorece
la endocitosis mediada por clatrinas (49). En la figura 6 se

60

50

%?células?trasnfectadas 40

30

20

10

0 protamina:SLNs dextrano:protamina:SLNs
SLNs

Figura 7. Transfección in vitro de células ARPE-19 tratadas con vectores no virales preparados con SLNs, protamina y dextrano.

Estos resultados demuestran el potencial de este vector SLNs solas (34) y además fue capaz de transfectar también
como sistema de administración de material genético para el pulmón. Estos resultados son debidos por un lado, al
tratamientos a base de terapia génica. Además, se efecto de la protamina, ya que su alto grado de
comprobó que no tiene actividad hemolítica y que no condensación del ADN hace que esté más protegido frente
induce aglutinación de glóbulos rojos (49), lo que a la degradación; por otro lado, el dextrano evitaría la
demuestra su biocompatibilidad. La administración interacción con componentes sanguíneos y aumentaría el
endovenosa a ratones Balb/c indujo transfección a nivel de tiempo de permanencia del vector en circulación
hígado, bazo y pulmón, que se pudo detectar hasta los 7 sanguínea.
días post-administración. La formulación preparada con
SLNs, dextrano y protamina, indujo mayores niveles de 5.3.b. Acido hialurónico (AH)
transfección y más duraderos en hígado y en bazo que las
La capacidad del AH de interaccionar con el receptor

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