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Solid lipid nanoparticles for gene therapy de flotilina, etc. (39), de tal forma que intervendrá un
mecanismo u otro según el tipo de célula y el tipo de
vectores pueden utilizar para penetrar en las células: vector.
macropinocitosis, endocitosis mediada por clatrinas,
endocitosis mediada por caveolas, endocitosis dependiente

Figura 3. Principales barreras para la transfección: degradación enzimática, agregación y opsonización, paso a través de la
membrana celular, degradación lisosomal, liberación del vector, entrada en el núcleo. NPC: complejo de poros nucleares, RISC:
“RNA-induced silencing complex”, SER: sistema retículo endotelial.

Una vez en el interior de la célula, el vector queda complex, NPC). Por ello, una estrategia para incrementar
incluido en un endosoma que se puede fusionar con los la entrada al núcleo es incorporar péptidos que porten
lisosomas, formándose un endolisosoma, en el que la secuencias de señalización nuclear, como es el caso de la
presencia de enzimas hidrolíticas hace que los ácidos protamina, que tiene secuencias de 6 argininas
nucleicos se puedan degradar. Por ello, es conveniente que consecutivas que actúan como secuencias de señalización
el vector permanezca poco tiempo en el interior del nuclear (41). Este péptido ha demostrado su capacidad de
endosoma, es decir, se debe favorecer el escape mejorar el proceso de transfección gracias a su capacidad
endosomal. La utilización de sustancias como DOPE de favorecer la entrada del material genético al núcleo
(dioleoilfosfatidiletanolamina), colesterol, cloroquina, o celular (42).
algunos péptidos (GALA, KALA) favorecen el escape
endosomal y por lo tanto la transfección (12). Existe 4. DISEÑO Y OPTIMIZACIÓN DE SLNs PARA
también la posibilidad de preparar vectores capaces de TERAPIA GÉNICA: INFLUENCIA DE FACTORES
proteger el material genético frente a la degradación RELACIONADOS CON LA FORMULACIÓN
lisosomal, de tal forma que la fusión del endosoma con el
lisosoma no necesariamente conduzca a la inhibición de la A la hora de diseñar un vector no viral a base de SLNs,
transfección (40). es fundamental llevar a cabo una adecuada selección de los
componentes de la formulación. En uno de nuestros
En el caso de ADN, una vez en el citoplasma debe ser primeros estudios (43), evaluamos la influencia de la
capaz de atravesar la membrana nuclear y acceder al composición de las SLNs sobre la capacidad de
núcleo. Este es un paso limitante debido a que la transfección in vitro. Las SLNs se elaboraron mediante
membrana nuclear es una barrera selectiva para moléculas una técnica de emulsificación/evaporación del solvente, y
de tamaño superior a 40 kDa, como son las moléculas de los componentes utilizados fueron el lípido sólido
ADN. La entrada en el núcleo puede llevarse a cabo a Precirol® ATO5, el lípido catiónico DOTAP (dioleoil
través de dos mecanismos: durante la mitosis, ya que fosfatidil etanolamina), y el tensioactivo Tween 80. En la
disminuye el efecto barrera de la membrana, o a través de figura 4 se recoge un esquema con el método de
los llamados complejos de poros nucleares (nuclear pore elaboración de las SLNs empleado (44).

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