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Regulación
de
la
neurotransmisión
glicinérgica…

bloqueo
farmacológico
específico
parece
reducir
la
sensación
de
dolor
en
ratas
(36,

37).

De
este
modo,
consideramos
de
interés
profundizar
en
los
mecanismos

moleculares
de
la
posible
implicación
de
GlyT2
en
la
acción
de
PGE2
sobre
la

inhibición
glicinérgica.
En
este
trabajo
hemos
observado
que
PGE2
produce
una

activación
de
la
recaptación
presináptica
llevada
a
cabo
por
GlyT2
y,
gracias
al
uso

de
agonistas
específicos
de
los
receptores
EP
de
la
prostaglandina,
hemos
podido

determinar
la
implicación
del
subtipo
de
receptor
EP3
en
el
efecto
observado.
En

consonancia
con
esto,
hemos
detectado
que
la
expresión
del
receptor
EP3
en

sinaptosomas
de
médula
espinal
de
rata
está
muy
por
encima
de
la
expresión
de

los
subtipos
EP2
y
EP4,
y
ligeramente
por
encima
de
la
expresión
de
EP1,
lo
que
es

coherente
con
los
resultados
obtenidos.

En
concreto,
la
activación
de
los
receptores
EP3
conlleva
usualmente

disminuciones
notables
de
AMP
cíclico
(AMPc)
y
aumentos
en
la
concentración
de

calcio
(Ca+2)
intracelular
(24).
Se
ha
descrito
que
aumentos
de
Ca+2
intracelular

pueden
producir
una
desubiquitinación
de
un
amplio
número
de
proteínas
en
la

sinapsis
(38)
por
lo
que
quisimos
comprobar
si
GlyT2
podría
sufrir

desubiquitinación
tras
un
aumento
de
Ca+2
intracelular
llevado
a
cabo
por
la

activación
del
receptor
EP3.
Esto
se
realizó
inmunoprecipitando
proteínas

ubiquitinadas
desde
sinaptosomas
de
médula
de
rata,
y
comprobando
si
PGE2

producía
cambios
en
la
cantidad
de
GlyT2
ubiquitinado.
Los
resultados
mostraron

una
disminución
significativa
en
la
ubiquitinación
de
GlyT2
tras
el
tratamiento
con

PGE2,
mientras
que
la
cantidad
total
de
proteína
no
se
vió
afectada.
La

ubiquitinación
de
GlyT2
ha
sido
recientemente
descrita
como
una
modificación

necesaria
para
la
endocitosis
del
transportador,
de
tal
modo
que
la
incapacidad
de

ubiquitinar
a
GlyT2
en
la
lisina
791
de
su
carboxilo
terminal
impide
su
endocitosis

regulada
por
PKC
(8).
La
imposibilidad
de
endocitosis
por
la
falta
de
ubiquitinación

produce,
por
tanto,
un
acúmulo
del
transportador
en
la
superficie
celular
(como

ocurre
con
otras
proteínas;
39),
lo
que
conlleva
un
aumento
del
número
de

moléculas
activas
en
membrana
plasmática,
aumentando
por
tanto
la
actividad

global
de
GlyT2.
Este
aumento
de
actividad
produce
una
aceleración
de
la

recaptación
del
neurotransmisor,
disminuyendo
el
tiempo
de
acción
de
este
en
el

espacio
sináptico
y
reduciendo
la
acción
sináptica
de
la
glicina.

En
conjunto,
estos
datos
muestran
que
PGE2
disminuye
la

neurotransmisión
glicinérgica
mediante
dos
efectos
coordinados
en
la
postsinapsis

y
en
la
presinapsis:
1)
en
la
postsinapsis
promueve
una
disminución
de
la
actividad

del
receptor
GlyRa3
por
fosforilación
directa
dependiente
de
la
transducción
por

receptores
EP2
(18);
y
2)
en
la
presinapsis
produce
un
aumento
de
la
recaptación

de
glicina
desde
el
espacio
sináptico
mediada
por
el
transportador
GlyT2,

presumiblemente
a
través
de
los
receptores
EP3
y
que
probablemente
es
debida
a

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