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M.
C.
AVENDAÑO

que
según
varias
publicaciones
acerca
de
esta
enzima,
el
aminoácido
Asp148
se

localiza
cerca
del
bolsillo
al
que
se
enlaza
el
cofactor
NADH.

La
enzima
InhA,
se
validó
como
diana
de
la
piridomicina
genéticamente,

transformando
la
cepa
H37Rv
con
un
plásmido
portador
del
gen
inhA
a
fin
de

comprobar
que
la
sobreexpresión
de
este
gen
en
la
cepa
salvaje
de
M.
tuberculosis

provoca
resistencia
al
antibiótico.
Todos
los
datos
obtenidos
en
éste
y
otros

experimentos,
corroboraron
que
la
mutación
D148G
de
la
enzima
InhA
es
la

responsable
de
la
resistencia
a
piridomicina
y
de
la
disminución
de
afinidad
del

cofactor
NADH,
sin
afectar
a
la
actividad
de
isoniazida
e
isotiazida.

Puesto
que
piridomicina
e
isoniazida
tienen
la
misma
diana,
se
hizo

necesario
estudiar
si
los
bacilos
resistentes
a
INH
procedentes
de
la
clínica

retenían
la
susceptibilidad
frente
a
piridomicina.
Ya
se
ha
dicho,
que
las

mutaciones
más
frecuentes
asociadas
a
las
resistencias
a
INH
se
encuentran
en
el

gen
katG
que
cataliza
la
catalasa-­-peroxidasa
requerida
para
su
bioactivación,

observándose
con
menor
frecuencia
mutaciones
en
la
región
promotora
del
gen

inhA
que
aumentan
la
expresión
de
la
diana.
De
las
ocho
muestras
resistentes
a

INH
analizadas
en
este
estudio,
cuatro
presentaron
mutaciones
en
el
gen
katG

(S315T),
tres
en
la
región
promotora
de
inhA,
y
en
una
se
encontraron
ambas.
La

susceptibilidad
a
moxifloxacina
fue
semejante
en
todas
las
cepas,
incluida
la

salvaje.
Las
cuatro
con
mutaciones
en
katG
mostraron,
en
comparación
con
la
cepa

H37Rv,
una
gran
resistencia
a
INH
pero
ninguna
resistencia
a
piridomicina,

mientras
que
la
mutación
en
el
promotor
inhA
produjo
una
resistencia
intermedia

a
INH
y
un
aumento
en
la
resistencia
a
piridomicina.
Así
pues,
los
mutantes
katG

(S315T),
que
son
los
que
producen
con
mayor
frecuencia
resistencias
a
INH

retienen
totalmente
la
sensibilidad
frente
a
piridomicina.
También
se
ha

demostrado
en
este
trabajo
que
este
antibiótico
es
un
fármaco
que
no
requiere
ser

bioactivado,
y
que
la
inhibición
de
InhA
que
origina
tiene
las
mismas

consecuencias
bioquímicas
que
produce
INH:
la
reducción
de
la
síntesis
de
ácidos

micólicos.

En
resumen,
la
cepa
resistente
PYR7
con
la
mutación
D148G
en
InhA,
no

muestra
resistencia
cruzada
a
isoniazida
ni
a
etionamida
mientras
que,
por
el

contrario,
la
mutación
S94A
responsable
de
la
resistencia
a
isoniazida
mantiene
la

sensibilidad
a
la
piridomicina.
Esto
sugiere
que
ambos
compuestos
son
inhibidores

competitivos
de
NADH
y
que
se
enlazan
al
mismo
bolsillo
pero
de
diferente
forma.

También
tiene
interés
la
ausencia
de
resistencia
cruzada
con
triclosán,
porque

demuestra
que
se
puede
inhibir
la
enzima
de
varias
maneras
sin
que
se
produzcan

resistencias
cruzadas.

La
definición
a
nivel
molecular
del
enlace
entre
la
piridomicina
y
la
enzima

InhA
no
ha
sido
posible
de
forma
directa
hasta
el
momento,
porque
a
pesar
de
un

ingente
trabajo
no
se
ha
encontrado
todavía
una
técnica
que
permita
la
obtención

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