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VOL. 74 (2), 203-228, 2008 UNA APROXIMACIÓN FARMACOLÓGICA...
Tras el lavado, se revelará la membrana con el Super Signal Subs-
trate Western Blotting según fabricante.
Estudios sobre la matriz extracelular
Para el estudio de los cambios de la matriz extracelular se emplea-
rá el método del alcian blue, que permite medir la producción de
matriz extracelular al registrarse un aumento en la absorbancia a
605 nm como consecuencia de la producción de dicha matriz. El pro-
tocolo seguido es el descrito por la casa comercial (Sigma-Aldrich).
Los estudios detallados de los niveles de producción de los colá-
genos II y X se llevaron a cabo realizando los correspondientes
wester blots, como se ha descrito previamente, empleando los anti-
cuerpos comerciales de las casas Calbiochem y Santa Cruz, a dilu-
ciones 1:500 y 1:100, respectivamente.
RESULTADOS
Identificación de los receptores P2Y
presentes en los condrocitos
Por medio de las técnicas de inmunocitoquímica ha sido posible
identificar los receptores presentes en los condrocitos normales y
acondroplásicos. De todos los anticuerpos ensayados las células se
marcaron positivamente frente a los receptores P2Y1, P2Y2, P2Y6 y
P2Y11 (Figura 5). No fue posible observar marcaje frente a otros re-
ceptores P2Y ni en las células acondroplásicas ni en las normales.
FIGURA 5. Presencia de los receptores P2Y2 en los condrocitos acondroplásicos.
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