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VOL. 73 (3), 725-746, 2007 FARMACOLOGÍA DE TERPENOIDES DE HELIANTHUS...

Cromatografía en columna con gel de sílice impregnado
con AgNO3

Esta técnica es muy utilizada para separar isómeros moleculares
que eluyen juntos por cromatografía ordinaria, y que sólo se diferen-
cian entre sí por el número de insaturaciones presentes en su estruc-
tura química. Tanto el ión Ag+ como la plata en su estado metálico
(Ag0) poseen cierta afinidad por los enlaces insaturados en una
molécula. La magnitud de la afinidad es proporcional al número de
instauraciones. La metodología fue la misma que se utilizó en la cro-
matografía en columna, pero en este caso se utiliza sílica gel im-
pregnada con nitrato de plata (AgNO3). Para este ensayo se utilizó
sílica gel 60 con 10% de AgNO3 (700 g de sílica gel + 70 g de AgNO3
+ 70 mL agua) (hcolumna = 26 cm, fcolumna = 6 cm). Como eluyente se
utilizó una mezcla de hexano: acetato de etilo 88:12, en elución
isocrática, eluyendo fracciones de 100 mL aproximadamente.

Identificación estructural de los compuestos obtenidos

Se llevó a cabo mediante técnicas de Espectroscopía de Resonan-
cia Magnética Nuclear (RMN) en un espectrómetro Avance Bruker
de 250 MHz, utilizando CDCl3 como solvente y tetrametilsilano como
patrón de referencia. Se realizaron espectros 1H-RMN, 13C-RMN,
DEPT-125 y HSQC con el fin de identificar la naturaleza estructural
de los carbonos.

Cromatografía en capa fina (TLC)

Esta técnica fue aplicada tanto a los extractos obtenidos como a
los productos eluidos en las cromatografías en columnas, que permi-
te visualizar de forma preliminar la composición de dichos extractos
y la pureza de los compuestos eluidos, respectivamente. Estas cro-
matografías se realizaron sobre cromatofolios con soporte de alu-
minio de Silicagel 60 F254 (Merck) con indicador de fluorescencia
al UV, utilizando como fases móviles una mezcla de hexano: acetato
de etilo 1:1 (para los extractos etéreos), tolueno: cloroformo: etanol
40:40:10 (para el extracto metanólico y los productos eluidos en CC)

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