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R. HERNÁNDEZ, T. TERUEL Y M. LORENZO CERAMIDA Y RESISTENCIA A LA INSULINA

Además de los efectos agudos de la insulina sobre la transloca-
ción de GLUT4, el transporte de glucosa en los tejidos insulino-
dependientes también puede estar regulado por cambios en la expresión
génica de los transportadores de glucosa inducidos por tratamientos cró-
nicos con insulina. En este sentido nuestro grupo de investigación había
descrito previamente que la insulina aumenta la expresión génica de
GLUT4 en los adipocitos marrones de manera dependiente de PI3-
quinasa. Puesto que Akt está situada por debajo de PI3-quinasa, quisimos
investigar la posible implicación de Akt en dicho efecto. Con ese propó-
sito bloqueamos la actividad Akt mediante el empleo del inhibidor quí-
mico ML-9 y realizamos ensayos de Northern blot para medir la cantidad
del mRNA de GLUT4 en respuesta a insulina. Asímismo, para determi-
nar si los efectos eran a nivel de la transcripción del gen, cotransfectamos
las células con la construcción GLUT4-CAT (donde el gen CAT está bajo
el control del promotor de GLUT4), y con el plásmido de expresión para
la proteína Akt con actividad dominante negativa. Los resultados obteni-
dos en dichos experimentos demostraron que, por debajo de PI3-quinasa,
Akt participa en la vía de señalización implicada en los efectos crónicos
de la insulina que conllevan a un aumento en la expresión génica de
GLUT4 en los adipocitos marrones.

MECANISMO DE INDUCCIÓN DE RESISTENCIA A LA INSULINA
POR TNFALFA EN EL TRANSPORTE DE GLUCOSA Y EN LA EX-
PRESIÓN GÉNICA DE GLUT4 EN ADIPOCITOS MARRONES A
TRAVÉS DE LA GENERACIÓN DE CERAMIDAS.

Como se ha comentado anteriormente, la Resistencia a la acción
de la insulina es la característica fundamental de la Diabetes tipo 2, y
dicho defecto se ha relacionado estrechamente con la Obesidad. El nexo
de unión entre ambas patologías puede ser el TNF-alfa, una citoquina
antilipogénica secretada por el propio tejido adiposo. Se ha demostrado
previamente que la expresión del TNF-alfa en tejido adiposo está elevada
en una variedad de modelos experimentales de obesidad y en personas

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