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VOL. 68 (3), ANAL. REAL ACAD. NAC. FARM

Akt es necesaria para el transporte de glucosa y la translocación de
GLUT4 inducidos por insulina en los adipocitos marrones fetales.

Figura 3.- Akt con actividad dominante negativa ('Akt) inhibe la translocación de
GLUT4 a la membrana plasmática inducida por insulina.
Las células HeLa se cotransfectaron transitoriamente con 10 Pg de GLUT4-GFP y
10 Pg de 'Akt o 10 Pg del vector vacío (V). A continuación las células se cultiva-
ron durante 24 horas en un medio de cultivo con 10% de suero fetal, se privaron de
suero durante una noche y se incubaron en presencia o ausencia de insulina 500 nM
(Ins) durante 30 minutos para visualizar la translocación de GLUT4-GFP por mi-
croscopía de fluorescencia. Las células se consideraron positivas para la transloca-
ción de GLUT4 si se observaba un anillo de fluorescencia en la periferia celular.
Los resultados se expresan como porcentaje de células positivas (medias r SEM de
4 experimentos distintos). El estudio para calcular el grado de significación estadís-
tica se ha realizado como en la Fig. 2. Las diferencias entre los valores en presencia
de insulina vs. controles se representan por (*) y las diferencias entre los valores en
presencia de insulina más 'Akt vs. insulina se representan por ('); *, ' p<0.01.

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