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VOL. 68 (3), ANAL. REAL ACAD. NAC. FARM
tivamente en los adipocitos marrones en cultivo dicho compuesto inhibía
tanto la fosforilación de Akt en el residuo Ser 473 como su actividad en
respuesta a insulina, sin afectar a la actividades PI3-quinasa ni PKC zeta
[28]. El transporte de glucosa inducido por insulina, medido mediante la
incorporación de 2-deoxi-D-(1-H3) glucosa a las células, se vio totalmen-
te bloqueado en células pretratadas con dicho inhibidor (Fig. 2B).
Figura 2.- El LY294002 y el ML-9 pero no la Rapamicina inhiben el transporte de
glucosa estimulado por insulina.
A) Las células privadas de suero durante 20 horas, fueron pretratadas durante 30
minutos en presencia o ausencia de LY294002 10 PM (LY) o rapamicina 25 ng/ml
(R) seguido de estimulación con insulina 10 nM (Ins) durante 30 minutos. Las células
control (C) se cultivaron 20 horas en ausencia de suero. B) Las células privadas de
suero durante 20 horas, se pretrataron con concentraciones crecientes (0-300 PM) de
ML-9 durante 10 minutos antes de ser estimulados 30 minutos en ausencia o presen-
cia de insulina 10 nM (Ins). El transporte de glucosa se midió en los últimos 10 minu-
tos del cultivo a través de la incorporación de 2-deoxi-D-(1-H3) glucosa a las células.
Los resultados se expresan como desintegraciones por minuto por 1x106 células (me-
dias r SEM de 4 experimentos distintos). El estudio para calcular el grado de signifi-
cación estadística se ha realizado a través de un análisis de varianzas. Las diferencias
entre los valores en presencia de insulina vs. controles se representan por (*) y las
diferencias entre los valores en presencia de insulina más LY vs. insulina se repre-
sentan por ('); *, ' p<0.01.
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