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VOL. 68 (3), ANAL. REAL ACAD. NAC. FARM

Figura 4.- Efecto de la C2-ceramida en el transporte de glucosa.
A)Experimentos de tiempo y B) dosis-respuesta. Las células fueron tratadas durante 2
y 6 horas con C2-ceramida 100 PM (A) o durante 6 horas con concentraciones cre-
cientes de C2-ceramida (B) seguido de incubación en presencia o ausencia de insulina
10 nM. Los resultados se expresan como porcentaje de transporte de glucosa estimu-
lado por insulina (medias r SEM de 4 experimentos distintos).
C) Las células control (C) o pretratadas con C2-ceramida 100 PM (C2) o C2-
dihidroceramida 100 PM (DHC) durante 6 horas se incubaron con insulina 10 nM
(Ins) durante 30 minutos y se midió la incorporación de 2-deoxi-D-(1-H3) glucosa
durante los últimos 10 minutos del cultivo. Los resultados se expresan como desinte-
graciones por minuto por 1x106 células (medias r SEM. de 4 experimentos distintos).
El estudio para calcular el grado de significación estadística se ha realizado como en
la Fig. 2. Las diferencias entre los valores en presencia de insulina vs. controles se
representan por (*) y las diferencias entre los valores en presencia de insulina más
C2-ceramida vs. insulina se representan por ('); *, ' p<0.01.

Los resultados obtenidos con ceramida en el transporte de glucosa
fueron corroborados con experimentos de translocación de GLUT4 a la
membrana plasmática por técnicas de inmunofluorescencia y de fraccio-
namiento celular, en los que se comprobó que la inducción de la transloca-
ción del transportador GLUT4 a la membrana plasmática por insulina no se
producía en células pretratadas con C2-ceramida (Fig. 5).

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