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Trichomonas vaginalis: The versatility of a tenacious parasite  tras el análisis de 129 aislados de T. vaginalis empleando
                                                                la misma diana EcoRI-HSP70. En ambos estudios se
entre los patrones genómicos de los aislados y la presencia     corrobora la heterogeneidad genómica que muestra este
de TVV, presencia de Mycoplasma, el origen geográfico o         parásito, en función del número elevado de patrones de
el desarrollo de resistencias. Sin embargo, los                 RFLP obtenidos por ambos grupos.
dendrogramas no mostraron asociaciones entre los
resultados genómicos y los fenotípicos (29). En este            4.3. Genes Ribosomales
sentido, Kaul et al. (30) en 2004 analizaron 15 aislados
frescos de mujeres asintomáticas y otros 15 de pacientes            El análisis de los genes ribosomales, en particular, el
con síntomas procedentes de India. Los resultados               que codifica para la subunidad pequeña (ARNr 18S)
agruparon todas las muestras asintomáticas. No obstante,        continúa siendo una de las herramientas principales para el
los valores de bootstrap en los aislados estudiados fue muy     análisis filogenético de especies debido a su naturaleza
bajo entre los agrupamientos y la sensibilidad a MTZ.           conservada y evolución lenta (33). En el campo de la
                                                                tricomonosis, la secuenciación del ARNr 18S ha sido una
4.2. RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism)            herramienta empleada en estudios de diagnóstico rápido de
                                                                esta enfermedad mediante PCR, mejorando la sensibilidad
    Los resultados obtenidos en la aplicación de esta           del diagnóstico de referencia (34, 35). La región genómica
técnica a la amplificación de la secuencia que codifica para    codificante de los ARN ribosomales 18S, 5.8S y 28S se
la proteína de choque térmico (HSP70) y la resistencia a        esquematiza en la Figura 4.
MTZ no mostraron ninguna correlación entre los
fragmentos de 36 aislados (31). En cambio, Meade et al.
(32) obtuvieron dos agrupaciones claramente diferenciadas

Figura 4. Esquema de la región genómica codificante de los ARN ribosomales 18S, 5.8S y 28S. A. Esquema de una unidad
transcripcional en la que cada ARNr se separa por un espaciador interno no codificante (ITS). B. Representación de dos unidades
transcripcionales separadas por el espaciador intergénico (IGS).

4.4. Espaciadores Internos (ITS)                                entre aislados obtenidos de pacientes con y sin
                                                                sintomatología. Sin embargo no lograron detectar una
    Los genes que codifican a los ARNr están mucho más          asociación clara entre la clínica y los perfiles de IGS-
conservados que los espaciadores internos (ITS),                RFLP, considerando este marcador inadecuado para los
convirtiéndose estos últimos en marcadores adecuados            estudios de caracterización intraespecífica en T. vaginalis.
para la diferenciación inter e intra-específica de
organismos (39) . Este hecho explica el alto número de              Todos los estudios han confirmado la idoneidad del
estudios en otros parásitos en los que se ha realizado la       locus ITS1 - 5.8S ARNr - ITS2 como herramienta para
diferenciación inter e intra-específica con éxito empleando     estudios filogenéticos en tricomonádidos (47-50). Otros
esta región como marcador molecular (40-44).                    grupos se han centrado en la caracterización de aislados,
                                                                habiendo obtenido variabilidades de entre el 15% y el 4%
    Los tricomonádidos se caracterizan por presentar un         en la región ITS de los aislados secuenciados. Algunos
locus ITS2 pequeño que presenta una estructura secundaria       autores han asociado mutaciones de nucleótidos
formada por una rama en lugar de tres (45). La secuencia        específicos, especialmente en el ITS1, con fenómenos de
genética compuesta por las regiones 18S ARNr - ITS1-            resistencia al metronidazol (26, 51) y con el desarrollo de
5.8S ARNr - ITS2 - 28S ARNr se encuentra codificada en          tricomonosis asintomáticas en las pacientes (52).
una única unidad transcripcional formada por varias copias
en tándem y de número variable en función del organismo             Este locus también ha sido empleado para el
(Figura 4.A). El análisis del genoma de T. vaginalis reveló     diagnóstico de casos de sospecha de tricomonosis
la existencia de 254 copias de la subunidad ribosomal           pulmonar. En los estudios desarrollados por Mallat,
pequeña y 251 copias del 5.8S ARNr (6). Cada una de             Bellanger y Leterrier se amplificaron muestras pulmonares
estas unidades transcripcionales se separan mediante otra       de pacientes afectados por un neumotórax post-trasplante
secuencia no codificante denominada espaciador                  cardíaco, un glioblastoma y un adenocarcinoma esofágico,
intergénico (IGS) (Figura 4.B). Simoes-Barbosa et al. (46)      respectivamente, identificando la presencia de T. tenax en
emplearon este locus para el estudio de la variabilidad         los lavados broncopulmonares mediante la secuenciación

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