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Tuberin protein: therapeutic target to activate autophagy and mitophagy avoiding the progression to type 2 diabetes

P-p70S6K (Thr-389) Cell Signaling (#9205) IgG Rabbit 1:1000 (WB)
PINK1 Novus Biologicals IgG Rabbit 1:1000 (WB)
(BC100-494)
S6 (5G10) Cell Signaling (#2217) mAb IgG 1:1000 (WB)
Rabbit
P-S6 (S235/236) Cell Signaling (#2211) 1:1000 (WB)
SIRT1 (H-300) Santa Cruz Biotechnology IgG Rabbit 1:1000 (WB)
(sc-15404) 1.100 (IP)
a-Tubulina Sigma-Aldrich (T6199) IgG Rabbit 1:5000 (WB)

TSC2 Cell Signaling (#3612) mAb IgG1 1:1000 (WB)
Mouse 1:100 (IP)
1:100 (IP)
IgG Rabbit
1:1000 (WB)
TSC2 (N-19) Santa Cruz Biotechnology IgG Rabbit
TSC2 (C-20) (sc-892) 1:1000 (WB)
Ubiquitina (FK2-H)* Santa Cruz Biotechnology IgG Rabbit
V5 (sc-893) 1:1000 (WB)
Enzo Life Sci (BML-PW0150) mAb IgG1
Mouse IgG2
Life Technologies (R960-25)
mAb
Mouse

2.5.b. Listado de anticuerpos secundarios

Anticuerpo Casa comercial (Ref) Conjugado Dilución
(Uso)

Sheep anti-rabbit GE Healthcare (NA931V) HRP 1:5000
(WB)

Sheep anti-mouse GE Healthcare (NA934V) HRP 1:3000
(WB)

Rabbit anti-guinea pig Abcam (ab-6771) HRP 1:7000

(WB)

2.5.c. Reactivos (CCCP)
Los agentes farmacológicos usados fueron:
Es un inhibidor químico de la fosforilación oxidativa.
• Cicloheximida (CHX): Solubilidad: DMSO. Concentración 5-20 µg/ml.

• EX-527

Es un inhibidor de la síntesis proteica en los eucariotas. Es un potente y selectivo inhibidor de SIRT1
Solubilidad: Agua. Concentración 6-100 µg/ml. Solubilidad en DMSO.
Concentración de uso: 100 nM.
• Carbonilcianuro m-clorofenil hidrazona
• Nicotinamida

@Real Academia Nacional de Farmacia. Spain Es un inhibidor alostérico de la actividad de SIRT1 a
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