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Role of insulin receptor A isoform and IGF-1R in the development of atherosclerotic plaque

Figura 1. Expresión de las isoformas del IR e IGF-1R y sus asociaciones en dos modelos experimentales de daño vascular. Análisis
por qRT-PCR de la expresión de IRA, IRB and IGF-1R en la aorta del ratón ApoE-/- (A), BATIRKO (B) y sus respectivos controles.
Geles representativos y sus cuantificaciones de la asociación de IRA con IGF-1R en la aorta del ratón ApoE-/- (C), BATIRKO (D) y sus
respectivos controles. Grupo control de 24 semanas (C24w; n=5); grupo ApoE-/- de 24 semanas (ApoE-/- 24w; n =5); grupo control de 52

semanas (C52w; n=6); grupo BATIRKO de 52 semanas (B52w; n=5). *p<0.05 vs. cada Control; †p<0.05 vs. grupo BATIRKO de 52

semanas.

3.2. Implicación de la IRA, IGF-1R y los receptores VSMCs expresan específicamente la isoforma del IRA o la
híbridos IRA/IGF-1R en la proliferación de las VSMCs IRB, respectivamente (Figure 2B).

Para estudiar el papel de las isoformas del IR en la A continuación comprobamos que las líneas celulares
proliferación de las VSMCs, se generaron cuatro nuevas reconstituidas presentan un IR funcional y analizamos la
líneas celulares aórticas de VSMCs: contienen el IR (WT fosforilación en Tyr del IR y de su sustrato más importante
and IRLoxP+/+ VSMCs), que han perdido el IR (IR-/- en estas células (IRS-1). La insulina indujo la fosforilación
VSMCs), y que expresan sólo la IRA (IRA VSMCs) o la en Tyr en todas las líneas celulares exceptuando IR-/-
IRB (IRB VSMCs). En primer lugar, se realizó el cultivo VSMCs. Además, analizamos la fosforilación de AKT,
primario de WT o IRLoxP+/+ VSMCs de arterias aortas p70 y ERK inducida por insulina, IGF-1 e IGF-2. Como
torácicas. Para comprobar que la inmortalización había cabía esperar, las IR-/- VSMCs respondían a IGF-1 e IGF-
funcionado realizamos un Western blot frente al AgT y 2, pero no a insulina, mientras que en las IRLoxP+/+
p53 (Figura 2A). También se utilizó una marcador VSMCs se produjo un aumento significativo de p-AKT, p-
p70 y p-ERK inducido por los tres estímulos. Se observó
específico de VSMCs como la a-actina de músculo liso una mayor afinidad y máxima fosforilación de AKT, p70 y
(a-SMA) para caracterizar las cuatro líneas (Figure 2B). A ERKs en respuesta a insulina o IGFs en IRA VSMCs
continuación, por Western blot frente al IRß, versus IRB VSMCs (Figura 2C y D). En este sentido, se ha
comprobamos que la línea celular, IR-/- VSMCs carece de descrito que la insulina induce una señalización más
IR y niveles muy similares del IR en IRA VSMCs, IRB sostenida en el tiempo en células pancreáticas que sólo
VSMCs e IRLoxP+/+ VSMCs (Figure 2B). Además expresan la isoforma A con respecto a las que solo
comprobamos por RT-PCR que las IRA VSMCs e IRB

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