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M.
Sánchez-­-Paniagua
López
&
al.

Estudios
previos
aportan
evidencias
de
que
aunque
el
tratamiento
posterior

con
MCH
no
permite
eliminar
completamente
el
ADN
adsorbido
inespecíficamente,

se
logra
una
disminución
considerable
de
las
interacciones
inespecíficas
y
una

eficiencia
de
hibridación
superior
a
la
de
una
SAM
pura
de
ácido
nucleico
tiolado

(24).
Con
el
objetivo
de
minimizar
las
absorciones
inespecíficas
de
la
sonda
de

captura
sobre
la
superficie
electródica,
en
todos
los
casos
se
añadió
mayor

cantidad
de
MCH
que
de
sonda
de
captura.
Valores
de
MCH
inferiores
a
0,5
mM

producían
descensos
drásticos
en
la
señal
voltamperométrica
del
1-­-naftol,

generándose
probablemente
una
monocapa
irregular.
Se
comprobó
que

concentraciones
superiores
a
4,5
mM
provocaban
el
desplazamiento
de
la
sonda
de

captura.
Como
consecuencia
se
seleccionaron
como
valores
límites
0,5
y
4,5
mM.

3.3.
Ensayo
preliminar

Antes
de
realizar
los
diseños
de
experimentos
se
llevó
a
cabo
un
estudio

previo
con
el
fin
de
comprobar
que
las
sondas
de
captura
e
indicadora
hibridan,
de

forma
selectiva,
con
el
analito
y
que
ese
evento
de
hibridación
se
traduce
en
una

señal
electroquímica.
Se
optó
por
valores
de
concentración
de
sonda
de
captura
y

MCH
utilizados
con
éxito
en
trabajos
anteriores
(16),
2
µM
y
4,5
mM

respectivamente.
El
resto
de
condiciones
experimentales
fueron
las
descritas
en
el

Procedimiento
Experimental.
En
la
Figura
3
se
muestra
el
voltamperograma

obtenido
con
el
analito
y
con
una
secuencia
no
complementaria
(nC),
ambas
a
un

nivel
de
concentración
1
nM.
El
analito
dio
una
señal
muy
superior
al
blanco

mientras
que
la
señal
generada
por
la
sonda
no
complementaria
fue
semejante
a
la

generada
por
el
blanco,
lo
que
demuestra
la
complementariedad
de
las
sondas
con

el
analito
y
la
especificidad
del
dispositivo.

7
6 blanco

nC 1 nM

5 analito 1 nM

I (µA) 4

3

2

1

0
0 0,2 0,4 0,6

E (V)

Figura
3.-­-
Voltamperogramas
obtenidos
con
la
secuencia
analito,
una
secuencia
no
complementaria

y
un
blanco.
Condiciones
experimentales:
Voltametría
diferencial
de
impulsos,
amplitud
de
pulso
20

mV,
velocidad
de
barrido
10
mV/s.

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