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Detección
de
alérgenos
de
cacahuete…
3.4.
Optimización
de
la
monocapa
Con
el
objetivo
de
optimizar
la
composición
de
la
monocapa
se
realizaron
dos
diseños
factoriales
completos
32,
ya
descritos
en
el
apartado
Diseño
estadístico,
siendo
las
variables
independientes
las
concentraciones
de
sonda
de
captura
y
de
MCH.
En
el
primero
de
ellos
se
utilizó
una
concentración
de
analito
de
10
nM.
El
diagrama
de
Pareto
(Figura
4.A)
muestra
la
influencia
de
las
variables
y
sus
interacciones
en
la
respuesta
del
sensor,
siendo
el
efecto
cuadrático
de
ambas
variables
el
de
mayor
influencia
en
la
respuesta.
El
efecto
individual
de
las
variables
muestra
una
influencia
menor,
siendo
positivo
el
efecto
del
MCH
y
negativo
el
efecto
de
la
sonda
de
captura.
El
modelo
matemático
obtenido
corresponde
a
la
función
--6 --6 --6 --6
Sanalito
(A)
=
5,22737×10
+
4,98504×10 [sonda
captura]
+
5,97693×10 [MCH]
--
4,50416×10 [sonda
2
--6 --6 2
captura] +
1,54737×10 [sonda
captura][MCH]
--
1,4×10 [MCH]
La
Figura
4.B
muestra
los
efectos
principales
sobre
la
intensidad
de
corriente
producidos
por
las
dos
variables.
En
la
Figura
4.C
se
muestra
la
superficie
de
respuesta
y
en
la
Figura
4.D
las
correspondientes
curvas
de
nivel
proyectadas
en
el
plano
formado
por
los
dos
factores.
Estas
curvas
de
nivel
muestran
las
condiciones
experimentales
para
las
que
se
obtiene
el
valor
máximo
de
respuesta
así
como
un
espacio
próximo
al
óptimo
con
la
misma
respuesta
para
distintas
condiciones
experimentales,
pudiendo
elegir
de
toda
la
zona
los
valores
de
los
factores
más
convenientes
según
otros
criterios
económicos
de
tipo
coste,
tiempo,
etc.
Este
máximo
viene
definido
por
los
valores
óptimos
de
los
factores
implicados
que
resultaron
ser
1µM
de
sonda
de
captura
y
2,5
mM
de
MCH.
(x 10-6)
[MCH]*[MCH]
[sonda captura]*[sonda captura] Intensidad (A)
[sonda captura]*[MCH]
[MCH]
[sonda captura]
Efecto estandarizado (A) [Sonda captura] [MCH] (B)
(x 10-6)
Intensidad (µA)
Intensidad (A) [MCH] 4
1.6
0.8
3.2
5.6
8
10.4
12.8
15.2
17.6
20
5 (C) [sonda captura] (D)
Figura
4.--
Resultados
del
diseño
factorial
32
con
analito
10
nM,
(A)
diagrama
de
Pareto
estandarizado
para
intensidad
de
corriente,
(B)
gráfica
de
efectos
principales
para
la
intensidad,
(C)
superficie
de
respuesta
y
(D)
curvas
de
nivel.
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