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Detección	
  de	
  alérgenos	
  de	
  cacahuete…	
  

	
  
3.4.	
  Optimización	
  de	
  la	
  monocapa	
  	
  

      Con	
   el	
   objetivo	
   de	
   optimizar	
   la	
   composición	
   de	
   la	
   monocapa	
   se	
   realizaron	
  

dos	
   diseños	
   factoriales	
   completos	
   32,	
   ya	
   descritos	
   en	
   el	
   apartado	
   Diseño	
  

estadístico,	
   siendo	
   las	
   variables	
   independientes	
   las	
   concentraciones	
   de	
   sonda	
   de	
  

captura	
  y	
  de	
  MCH.	
  En	
  el	
  primero	
  de	
  ellos	
  se	
  utilizó	
  una	
  concentración	
  de	
  analito	
  de	
  

10	
  nM.	
  El	
  diagrama	
  de	
  Pareto	
  (Figura	
  4.A)	
  muestra	
  la	
  influencia	
  de	
  las	
  variables	
  y	
  

sus	
  interacciones	
  en	
  la	
  respuesta	
  del	
  sensor,	
  siendo	
  el	
  efecto	
  cuadrático	
  de	
  ambas	
  

variables	
   el	
   de	
   mayor	
   influencia	
   en	
   la	
   respuesta.	
   El	
   efecto	
   individual	
   de	
   las	
  

variables	
   muestra	
   una	
   influencia	
   menor,	
   siendo	
   positivo	
   el	
   efecto	
   del	
   MCH	
   y	
  

negativo	
   el	
   efecto	
   de	
   la	
   sonda	
   de	
   captura.	
   El	
   modelo	
   matemático	
   obtenido	
  

corresponde	
  a	
  la	
  función	
  

                                       -­-6 -­-6                                              -­-6 -­-6
Sanalito	
   (A)	
   =	
   5,22737×10 	
   +	
   4,98504×10 [sonda	
   captura]	
   +	
   5,97693×10 [MCH]	
   -­-	
   4,50416×10 [sonda	
  

      2	
   -­-6                                                              -­-6 2	
  
captura] +	
  1,54737×10 [sonda	
  captura][MCH]	
  -­-	
  1,4×10 [MCH]

	
  

      La	
   Figura	
   4.B	
   muestra	
   los	
   efectos	
   principales	
   sobre	
   la	
   intensidad	
   de	
  

corriente	
  producidos	
  por	
  las	
  dos	
  variables.	
  En	
  la	
  Figura	
  4.C	
  se	
  muestra	
  la	
  superficie	
  

de	
   respuesta	
   y	
   en	
   la	
   Figura	
   4.D	
   las	
   correspondientes	
   curvas	
   de	
   nivel	
   proyectadas	
  

en	
   el	
   plano	
   formado	
   por	
   los	
   dos	
   factores.	
   Estas	
   curvas	
   de	
   nivel	
   muestran	
   las	
  

condiciones	
   experimentales	
   para	
   las	
   que	
   se	
   obtiene	
   el	
   valor	
   máximo	
   de	
   respuesta	
  

así	
   como	
   un	
   espacio	
   próximo	
   al	
   óptimo	
   con	
   la	
   misma	
   respuesta	
   para	
   distintas	
  

condiciones	
   experimentales,	
   pudiendo	
   elegir	
   de	
   toda	
   la	
   zona	
   los	
   valores	
   de	
   los	
  

factores	
  más	
  convenientes	
  según	
  otros	
  criterios	
  económicos	
  de	
  tipo	
  coste,	
  tiempo,	
  

etc.	
  Este	
  máximo	
  viene	
  definido	
  por	
  los	
  valores	
  óptimos	
  de	
  los	
  factores	
  implicados	
  

que	
  resultaron	
  ser	
  1µM	
  de	
  sonda	
  de	
  captura	
  y	
  2,5	
  mM	
  de	
  MCH.	
  

      	
  

                                                                              (x 10-6)

            [MCH]*[MCH]

      [sonda captura]*[sonda captura]                                         Intensidad (A)
                [sonda captura]*[MCH]

                       [MCH]
            [sonda captura]

                                  Efecto estandarizado                   (A)                  [Sonda captura]  [MCH]  (B)
            (x 10-6)
                                                                                                                          Intensidad (µA)
            Intensidad (A)                                                    [MCH]                                              4
                                                                                                                                 1.6
                                                                                                                                 0.8
                                                                                                                                 3.2
                                                                                                                                 5.6
                                                                                                                                 8
                                                                                                                                 10.4
                                                                                                                                 12.8
                                                                                                                                 15.2
                                                                                                                                 17.6
                                                                                                                                 20

                                                        5 (C)                                 [sonda captura]         (D)

                                                                                                                                	
  
Figura	
   4.-­-	
   Resultados	
   del	
   diseño	
   factorial	
   32	
   con	
   analito	
   10	
   nM,	
   (A)	
   diagrama	
   de	
   Pareto	
  

estandarizado	
  para	
  intensidad	
  de	
  corriente,	
  (B)	
  gráfica	
  de	
  efectos	
  principales	
  para	
  la	
  intensidad,	
  (C)	
  

superficie	
  de	
  respuesta	
  y	
  (D)	
  curvas	
  de	
  nivel.	
  

                                                                                                                            	
  387	
  

	
  
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