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Detección
de
alérgenos
de
cacahuete…

Con
el
objetivo
de
conocer
la
señal
debida
exclusivamente
al
analito,
se

generó
una
nueva
variable
diferencia
(señal
del
analito
–
señal
del
blanco).
El

modelo
matemático
obtenido
corresponde
a
la
ecuación

-­-6 -­-6 -­-6 -­-6
Sanalito-­-Sblanco
(A)
=4,39816×10
+
5,13019×10
[sonda
captura]
+
6,17592×10
[MCH]
-­-
4,49307×10

2
-­-6 -­-6 2
[sonda
captura] +
1,51579×10
[sonda
captura][MCH]
-­-
1,42×10
[MCH]

En
la
Figura
6
se
muestran
la
superficie
de
respuesta
para
el
analito,
el

blanco
y
la
diferencia
y
la
curva
de
nivel
para
la
diferencia
en
la
Figura
6.D.
Los

valores
óptimos
prácticamente
coincidieron
con
los
obtenidos
previamente,
1µM

de
sonda
de
captura
y
2,5
mM
de
MCH,
ya
que
la
señal
obtenida
por
el
blanco,
en

estas
condiciones,
es
prácticamente
despreciable
frente
a
la
obtenida
con
el

analito.
Reducir
los
valores
del
blanco
es
uno
de
los
principales
objetivos
en
estos

dispositivos
analíticos,
para
así
aumentar
la
relación
señal/blanco
y,
como

consiguiente,
el
límite
de
detección.
Los
blancos
obtenidos
en
estas
condiciones

experimentales
hacen
que
la
relación
S/B
aumente
de
manera
apreciable.

(x 10-6) (x 10-6)

Itensidad (A) Itensidad (A)

Itensidad (A)

(A) (B)

(x 10-6) Intensidad (µA)

Itensidad (A) [MCH] 4

1.6
0.8
3.2
5.6
8
10.4
12.8
15.2
17.6

20

(C) 12 (D)

[sonda captura]

Figura
6.-­-
Curvas
de
superficie
de
respuesta:
(A)
10
nM
de
analito,
(B)
blanco
y
(C)
diferencia
10

nM
analito-­-blanco.
(D)
Curva
de
nivel
para
la
variable
diferencia.

3.5.
Curva
de
calibrado
y
estudio
de
reproducibilidad

Se
realizó
una
curva
de
calibrado,
bajo
las
condiciones
experimentales

óptimas
obtenidas
de
los
diseños
de
experimentos,
1µM
de
sonda
de
captura
y
2,5

mM
de
MCH.
Se
observó
una
relación
lineal
entre
la
intensidad
de
corriente
y
la

concentración
de
analito,
con
un
intervalo
lineal
de
1·10-­-10
a
1
10-­-7
M
(Figura7),

una
ecuación
I
(A)
=
2·10-­-6
C
(nM)
+
4·10-­-6,
y
un
coeficiente
de
regresión:
r=0,998.

El
límite
de
detección
resultó
ser
50
pM.
Para
la
reproducibilidad
se
midió
la

respuesta
de
una
disolución
de
analito
10
nM
en
ocho
electrodos
diferentes,
el

coeficiente
de
variación
obtenido
fue
7,56
%
(n
=
8).

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