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P. 150

 M.	
  Sánchez-­-Paniagua	
  López	
  &	
  al.	
  

	
  
        En	
   general,	
   los	
   diseños	
   de	
   experimentos	
   se	
   escriben	
   en	
   términos	
   de	
  

variables	
  codificadas.	
  En	
  un	
  diseño	
  a	
  tres	
  niveles,	
  como	
  es	
  este	
  caso,	
  los	
  niveles	
  de	
  
los	
  factores	
  codificados	
  son	
  +1,	
  0	
  y	
  -­-1,	
  donde	
  +1	
  es	
  el	
  valor	
  máximo	
  considerado,	
  -­-1	
  
el	
  valor	
  mínimo	
  y	
  0	
  el	
  valor	
  central.	
  En	
  la	
  Tabla	
  1	
  se	
  muestra	
  la	
  matriz	
  codificada	
  y	
  
la	
   matriz	
   experimental	
   y	
   los	
   niveles	
   experimentales	
   fijados	
   para	
   cada	
   uno	
   de	
   los	
  
factores	
  estudiados.	
  	
  

Tabla	
  1.	
  -­-	
  Matriz	
  codificada	
  y	
  matriz	
  experimental	
  del	
  Diseño	
  Factorial	
  32	
  	
  

Matriz	
  codificada	
                                                Matriz	
  experimental	
  

Niveles	
  del	
  factor	
  1	
    Niveles	
  del	
  factor	
  2	
    Concentración	
   de	
   la	
   sonda	
   Concentración	
    de	
  

0	
                                -­-1	
                             de	
  captura	
  (µM)	
     MCH	
  (mM)	
  
0	
                                0	
  
+1	
                               +1	
                               1,05	
                      0,5	
  
0	
                                0	
  
0	
                                +1	
                               1,05	
                      2,5	
  
-­-1	
                             +1	
  
-­-1	
                             -­-1	
                             2	
   4,5	
  
+1	
                               -­-1	
  
0	
                                0	
                                1,05	
                      2,5	
  
0	
                                0	
  
                                                                      1,05	
                      4,5	
  
        	
  
                                                                      0,1	
   4,5	
  

                                                                      0,1	
   0,5	
  

                                                                      2	
   0,5	
  

                                                                      1,05	
                      2,5	
  

                                                                      1,05	
                      2,5	
  

        El	
  diseño	
  propuesto	
  se	
  realizó,	
  en	
  el	
  mismo	
  instrumento,	
  el	
  mismo	
  día	
  y	
  por	
  
el	
  mismo	
  operador,	
  es	
  decir,	
  en	
  condiciones	
  de	
  repetibilidad.	
  La	
  aleatoriedad	
  en	
  el	
  
orden	
  de	
  realización	
  de	
  los	
  experimentos	
  asegura,	
  en	
  la	
  medida	
  de	
  lo	
  posible,	
  que	
  
factores	
  incontrolados	
  no	
  afecten	
  de	
  forman	
  sistemática	
  a	
  los	
  resultados	
  obtenidos	
  
y	
  se	
  asegura	
  que	
  las	
  estimaciones	
  de	
  la	
  varianza	
  en	
  la	
  repetibilidad	
  reflejen	
  de	
  
manera	
  adecuada	
  los	
  aspectos	
  aleatorios	
  del	
  proceso.	
  

3.	
  RESULTADOS	
  Y	
  DISCUSIÓN	
  

3.1.	
  Selección	
  de	
  las	
  sondas	
  de	
  oligonucleótidos	
  

        Para	
   obtener	
   un	
   sensor	
   útil	
   desde	
   el	
   punto	
   de	
   vista	
   analítico,	
   el	
   fragmento	
  
de	
   oligonucleótidos	
   elegido	
   como	
   analito	
   tiene	
   que	
   cumplir	
   como	
   mínimo	
   las	
  
siguientes	
   características:	
   i)	
   ser	
   específico	
   del	
   cacahuete	
   y	
   ii)	
   no	
   tratarse	
   de	
   una	
  
secuencia	
  de	
  ADN	
  muy	
  larga	
  (no	
  más	
  de	
  100	
  nucleótidos)	
  para	
  evitar	
  la	
  aparición	
  
de	
   estructuras	
   secundarias	
   y	
   apareamientos	
   de	
   bases	
   que	
   dificultarían	
   la	
  
hibridación	
  (20).	
  

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