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P. 154

 M.	
  Sánchez-­-Paniagua	
  López	
  &	
  al.	
  

	
  
        	
  

        Debido	
   a	
   la	
   complejidad	
   de	
   la	
   monocapa	
   es	
   habitual	
   la	
   aparición	
   de	
  
adsorciones	
   inespecíficas	
   de	
   las	
   sondas	
   y	
   los	
   agentes	
   que	
   la	
   componen	
   y	
   que	
   se	
  
traduce	
   en	
   señales	
   indeseables.	
   Para	
   averiguar	
   la	
   posible	
   existencia	
   de	
   estas	
  
adsorciones	
   y	
   su	
   efecto	
   en	
   la	
   señal,	
   se	
   realizó	
   un	
   segundo	
   diseño	
   con	
   una	
  
disolución	
   blanco.	
   La	
   matriz	
   experimental	
   y	
   los	
   niveles	
   de	
   los	
   factores	
   del	
   diseño	
  
factorial	
   32	
   fueron	
   los	
   mismos	
   que	
   en	
   el	
   diseño	
   anterior.	
   Según	
   el	
   diagrama	
   de	
  
Pareto	
  (Figura	
  5.A),	
  el	
  MCH	
  fue	
  el	
  factor	
  de	
  mayor	
  influencia,	
  siendo	
  ésta	
  negativa	
  
al	
  igual	
  que	
  la	
  sonda	
  de	
  captura,	
  es	
  decir,	
  el	
  blanco	
  dio	
  menor	
  señal	
  al	
  aumentar	
  el	
  
contenido	
   de	
   sonda	
   y	
   agente	
   bloqueante.	
   Este	
   hecho	
   se	
   atribuye	
   a	
   la	
   formación,	
  
bajo	
  estas	
  condiciones,	
  de	
  una	
  monocapa	
  compacta	
  y	
  sin	
  huecos	
  que	
  dificultan	
  las	
  
adsorciones	
  inespecíficas.	
  El	
  modelo	
  matemático	
  ajustado	
  corresponde	
  a	
  la	
  función	
  

                                       -­-7 -­-7                                          -­-7 -­-8	
  
Sblanco	
   (A)	
   =	
   8,43393×10 	
   -­-	
   1,48473×10 [sonda	
   captura]	
   -­-	
   2,19162×10 [MCH]	
   -­-	
   1,19114×10 [sonda	
  

         2	
   -­-8	
                                                     -­-8 2
captura] +	
  3,32895×10 [sonda	
  captura][MCH]+	
  2,3625×10 [MCH] 	
  

        La	
   Figura	
   5.B	
   muestra	
   los	
   efectos	
   principales	
   sobre	
   la	
   intensidad	
   de	
  
corriente	
  producidos	
  por	
  las	
  dos	
  variables,	
  no	
  estableciéndose	
  un	
  valor	
  mínimo	
  de	
  
respuesta	
  para	
   la	
  sonda	
  de	
  captura	
  en	
  la	
  zona	
  de	
  experimentación.	
   Así	
  mismo,	
  la	
  
superficie	
  de	
  respuesta	
  (Figura	
  5.C)	
  no	
  presenta	
  un	
  óptimo	
  y	
  las	
  curvas	
  de	
  nivel	
  de	
  
este	
   ensayo	
   (Figura	
   5.D)	
   muestran	
   una	
   tendencia	
   que	
   apunta	
   hacia	
   la	
   posibilidad	
  
de	
   modificar	
   el	
   campo	
   experimental	
   hacia	
   valores	
   mayores	
   de	
   sonda	
   de	
   captura,	
  
sin	
   embargo,	
   mayores	
   concentraciones	
   de	
   sonda	
   de	
   captura	
   dificultarían	
   la	
  
reacción	
  de	
  hibridación	
  por	
  impedimento	
  estérico.	
  

                                                                   (x 10-8)

                                [MCH]                                     Intensidad (A)
                     [MCH]*[MCH]
                      [sonda captura   Efecto estandarizado  (A)                          [sonda captura]  [MCH]  (B)
          [sonda captura]*[MCH]
[sonda captura]*[sonda captura]                                                                                   Intensidad (µA)

                      (x 10-8)                                                                                          0,25
                                                                                                                        0,31
         Intensidad (A)                                            [MCH]                                                0,37
                                                                                                                        0,43
                                                                                                                        0,49
                                                                                                                        0,55
                                                                                                                        0,61
                                                                                                                        0,67
                                                                                                                        0,73
                                                                                                                        0,79
                                                                                                                        0,85

                                                             (C) [sonda captura]                                  (D)

Figura	
   5.-­-	
   Resultados	
   del	
   diseño	
   factorial	
   32	
   con	
   un	
   blanco	
   (A)	
   diagrama	
   de	
   Pareto	
   estandarizado	
    	
  

para	
  intensidad	
  de	
  corriente,	
  (B)	
  gráfica	
  de	
  efectos	
  principales	
  para	
  la	
  intensidad,	
  (C)	
  superficie	
  de	
  

respuesta	
  y	
  (D)	
  curvas	
  de	
  nivel.	
  	
  

                                                             	
  

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