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POTENCIACIÓN
DE
LA
ACTIVIDAD
ANTITUMORAL
DE
DOXORRUBICINA…

Los
ensayos
de
liberación
in
vitro
de
doxorrubicina
se
realizaron
utilizando

las
nanopartículas
Fe3O4/PCL
formuladas
bajos
las
condiciones
óptimas
de

vehiculización
de
este
fármaco
(ver
sección
3.8.).
Este
ensayo
se
realizó
por

triplicado
a
37,0
±
0,5
ºC,
utilizando
el
método
de
diálisis,
y
un
tampón
NaOH-­-
KH2PO4
(pH
=
7,4
±
0,1)
como
medio
de
liberación.
Brevemente,
las
bolsas
de

diálisis
(Spectrum®
Spectra/Por®
6,
EE.UU.)
se
dejaron
sumergidas
en
agua

bidestilada
durante
12
horas
antes
de
comenzar
el
ensayo.
Estas
bolsas
se

caracterizan
por
un
tamaño
de
poro
de
2000
Da,
que
permite
retener
las

nanopartículas
en
su
interior,
dejando
pasar
únicamente
la
doxorrubicina
cedida

por
las
nanopartículas
hasta
el
medio
de
liberación.
Las
muestras
del
medio
de

liberación
(1
mL)
se
recogieron
según
el
siguiente
intervalo
de
tiempos:
0,08,
0,25,

0,5,
0,75,
1,
2,
3,
4,
5,
6,
9
y
12
horas,
y
2,
3,
4,
5,
6,
7,
8,
9,
10,
11,
12,
13,
14
y
15

días.
Las
muestras
fueron
analizadas
mediante
espectrofotometría
ultravioleta-­-
visible
a
la
longitud
de
onda
de
máxima
absorbancia
de
la
doxorrubicina
(481
nm).

Debe
tenerse
en
cuenta
que,
para
mantener
las
condiciones
sink,
es
preciso

reponer
el
medio
de
liberación
tras
cada
toma
de
muestra
con
un
volumen
igual
de

la
solución
tampón,
conservado
a
la
misma
temperatura.

2.2.6.
Evaluación
de
la
actividad
antitumoral
in
vivo
de
las
nanopartículas

magnetita/poli(e-­-caprolactona)
con
doxorrubicina
vehiculizada

En
este
estudio
se
investigó
la
actividad
antitumoral
que
se
obtiene
tras
la

administración
intravenosa
de
una
suspensión
de
nanopartículas
Fe3O4/PCL
con

doxorrubicina
incorporada
(dosis
equivalente
de
fármaco:
8
mg/Kg),
las
cuáles
son

guiadas
magnéticamente
hasta
el
tejido
tumoral
mediante
un
imán
permanente
de

400
mT.
Para
ello,
se
utilizó
un
modelo
de
ratones
Balb/c
con
tumor
subcutáneo

inducido
con
células
murinas
EMT6
de
cáncer
de
pulmón.

Los
experimentos
se
realizaron
según
la
normativa
europea
sobre
el

cuidado
y
utilización
de
animales
de
experimentación.
Se
utilizaron
ratones
Balb/c

de
4
–
5
semanas
de
edad
y
con
un
peso
medio
˜
15
gramos,
los
cuáles
disponían

de
agua
y
comida
estándar
para
ratón
ad
libitum.
El
desarrollo
del
modelo
de

tumor
subcutáneo
en
los
animales
implicó
la
inyección
subcutánea
(zona
dorsal

superior
derecha)
de
células
murinas
EMT6
(106
células
en
una
suspensión
acuosa

de
Matrigel™
enriquecida
con
factores
de
crecimiento).
Una
vez
que
los
ratones

desarrollaron
un
tumor
subcutáneo
palpable
(tras
5
días),
éstos
se
dividieron
en
6

grupos
de
tratamiento
con
6
animales
por
grupo.
En
concreto:
grupo
control
(sin

tratamiento),
grupo
tratado
con
una
solución
acuosa
de
doxorrubicina
(dosis:
8

mg/Kg),
grupo
(placebo)
tratado
con
nanopartículas
Fe3O4/PCL
sin
fármaco

cargado
y
guiadas
mediante
un
imán
permanente
de
400
mT
(misma
dosis
de

nanopartículas
y
esquema
de
tratamiento),
grupo
tratado
con
nanopartículas

Fe3O4/PCL
con
doxorrubicina
incorporada
(dosis
equivalente
de
doxorrubicina:
8

mg/Kg)
pero
sin
ser
guiadas
magnéticamente,
y
grupo
tratado
con
nanopartículas

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