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B.
MARTÍN
&
col

Figura
2.
-­-Esquema
del
ensayo
tipo
sándwich.

3.
RESULTADOS
Y
DISCUSIÓN

3.1.
Diseño
propuesto

El
diseño
del
genosensor
se
basa
en
la
formación
de
una
monocapa

autoensamblada
compuesta
por
sonda
de
captura
y
un
agente
bloqueante.
Se

propone
un
ensayo
tipo
sándwich
en
el
cual
parte
de
la
secuencia
del
analito
es

complementaria
con
la
sonda
de
captura
y
parte
con
una
sonda
indicadora,
esta

última
marcada
con
una
molécula
de
biotina
en
su
extremo
3’
para
su
posterior

unión
al
conjugado
estreptavidina-­-enzima
a
través
del
enlace
de
alta
afinidad

biotina-­-estreptavidina.
Con
este
ensayo
se
evita
la
necesidad
de
marcar
al
analito.

La
enzima
utilizada,
fosfatasa
alcalina
(ALP),
cataliza
la
conversión
de
1-­-
naftilfosfato
a
1-­-naftol,
producto
electroactivo
de
estructura
plana
heterocíclica

capaz
de
intercalarse
en
la
monocapa
de
ADN,
cuya
oxidación
se
mide
mediante

voltamperometría
de
pulso
diferencial
(DPV).

3.2.
Elección
de
la
sonda
de
captura

Debido
a
la
capacidad
antigénica
demostrada
del
segmento
de
33-­-mer
de
la

proteína
a-­-2-­-gliadina,
se
seleccionó
la
secuencia
de
99
nucleótidos
que
codifica

para
este
fragmento
proteico,
para
ser
utilizada
como
analito.

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