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P. 64

B.	
  MARTÍN	
  &	
  col	
  

	
  
electrodos	
   se	
   limpiaron	
   con	
   etanol	
   y	
   agua	
   Milli-­-Q,	
   seguido	
   de	
   un	
   pretratamiento	
  
electroquímico	
   mediante	
   barridos	
   cíclicos	
   con	
   H2SO4	
   con	
   el	
   fin	
   de	
   eliminar	
  
contaminantes	
  y	
  calcular	
  el	
  área	
  efectiva	
  del	
  electrodo	
  (13).	
  

        Todos	
   los	
   experimentos	
   se	
   llevaron	
   a	
   cabo	
   a	
   temperatura	
   ambiente	
   y	
   cada	
  
medida	
   se	
   realizó	
   en	
   un	
   nuevo	
   electrodo.	
   Las	
   medidas	
   de	
   pH	
   se	
   realizaron	
   en	
   un	
  
pH-­-metro	
  Crison	
  micropH	
  2001	
  (España).	
  
	
  

                                                                                                              	
  
Figura	
  1.-­-	
  Electrodo	
  serigrafiado	
  (www.dropsens.com).	
  

	
  

2.2.	
  Reactivos	
  
        El	
   Ditiotreitol	
   (DTT),	
   6-­-mercapto-­-1-­-hexanol	
   (MCH),	
   fosfatasa	
   alcalina-­-

estreptavidina	
   (ALP-­-Strp),	
   1-­-naftilfosfato,	
   albúmina	
   humana	
   (BSA)	
   y	
   tween	
   20	
  
fueron	
   adquiridos	
   de	
   Sigma-­-Aldrich	
   (España)	
   y	
   utilizados	
   sin	
   purificación	
   previa.	
  
Las	
   sales	
   para	
   la	
   preparación	
   de	
   los	
   buffers	
   (Tris,	
   MgCl2,	
   KCl)	
   y	
   buffer	
   20xSSPE	
  
(fosfato	
  sódico	
  salino	
  con	
  EDTA)	
  pH	
  7,4	
  fueron	
  obtenidos	
  de	
  Sigma-­-Aldrich.	
  Etanol	
  
al	
   96%	
   e	
   hidroquinona	
   fueron	
   suministrado	
   por	
   Panreac	
   (España),	
   1-­-naftol	
   por	
  
Merck	
  (España)	
  y	
  ferrocianuro	
  de	
  potasio	
  por	
  Probus	
  (España).	
  

        Las	
   secuencias	
   de	
   oligonucleótidos	
   utilizadas	
   fueron	
   suministradas	
   por	
  
Sigma-­-Genosys	
   (Reino	
   Unido).	
   Todas	
   las	
   disoluciones	
   de	
   oligonucleótidos	
   fueron	
  
preparadas	
  en	
  agua	
  Milli-­-Q	
  y	
  almacenadas	
  a	
  -­-20ºC.	
  
	
  

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