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B.
MARTÍN
&
col
electrodos
se
limpiaron
con
etanol
y
agua
Milli--Q,
seguido
de
un
pretratamiento
electroquímico
mediante
barridos
cíclicos
con
H2SO4
con
el
fin
de
eliminar
contaminantes
y
calcular
el
área
efectiva
del
electrodo
(13).
Todos
los
experimentos
se
llevaron
a
cabo
a
temperatura
ambiente
y
cada
medida
se
realizó
en
un
nuevo
electrodo.
Las
medidas
de
pH
se
realizaron
en
un
pH--metro
Crison
micropH
2001
(España).
Figura
1.--
Electrodo
serigrafiado
(www.dropsens.com).
2.2.
Reactivos
El
Ditiotreitol
(DTT),
6--mercapto--1--hexanol
(MCH),
fosfatasa
alcalina--
estreptavidina
(ALP--Strp),
1--naftilfosfato,
albúmina
humana
(BSA)
y
tween
20
fueron
adquiridos
de
Sigma--Aldrich
(España)
y
utilizados
sin
purificación
previa.
Las
sales
para
la
preparación
de
los
buffers
(Tris,
MgCl2,
KCl)
y
buffer
20xSSPE
(fosfato
sódico
salino
con
EDTA)
pH
7,4
fueron
obtenidos
de
Sigma--Aldrich.
Etanol
al
96%
e
hidroquinona
fueron
suministrado
por
Panreac
(España),
1--naftol
por
Merck
(España)
y
ferrocianuro
de
potasio
por
Probus
(España).
Las
secuencias
de
oligonucleótidos
utilizadas
fueron
suministradas
por
Sigma--Genosys
(Reino
Unido).
Todas
las
disoluciones
de
oligonucleótidos
fueron
preparadas
en
agua
Milli--Q
y
almacenadas
a
--20ºC.
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