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I (A) DISEÑO
DE
UN
GENOSENSOR…

1,4E-05 I max (A) 1,2E-05
1,2E-05 1,0E-05
1,0E-05 8,0E-06
8,0E-06 6,0E-06
6,0E-06 4,0E-06
4,0E-06 2,0E-06
2,0E-06 0,0E+00

0,0E+00 3,0E-06 6,0E-06 9,0E-06
Concentración de analito (M)

bla nco
no complementaria 1 µM
analito 0,2 µM
analito 1 µM
analito 5 µM
analito 10 µM

0,0E+00 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7
0

E (V)

Figura
4.-­-
Respuesta
del
genosensor
con
sonda
indicadora
10
µM.
Inlet:
Relación
Imax-­-
concentración
de
analito.

Considerando
que
un
aumento
de
la
concentración
de
sonda
indicadora
y

enzima
conlleva
un
aumento
en
el
intervalo
lineal
pero
también
origina
un

aumento
de
la
señal
del
blanco,
y
dado
que
nuestro
objetivo
es
la
detección
de

concentraciones
de
analito
inferiores
a
1
µM,
comenzaremos
utilizando
de
las

mínimas
concentraciones
estudiadas
(4,3·
10-­-3
g/L
de
ALP-­-Strp
y
2
µM
de
sonda

indicadora).

3.5.
Optimización
de
la
fase
sensora

La
optimización
de
la
fase
sensora
(sonda
de
captura
y
MCH
inmovilizados

sobre
la
superficie
del
electrodo
de
trabajo)
es
necesaria
para
obtener
una

monocapa
homogénea
que
favorezca
la
hibridación
pero
no
tan
compacta
que

genere
repulsiones
electroestáticas
y
electroestéricas
(20).

La
función
del
MCH
es
disponer
adecuadamente
las
hebras
de
ADN

quimisorbidas,
algunas
inicialmente
inclinadas,
situándolas
de
manera

perpendicular
a
la
superficie
(11).
El
MCH
se
intercala
entre
las
hebras
de
ADN
y
se

obtiene
así
una
monocapa
mixta
organizada,
en
la
que
las
cadenas
se
orientan

paralelas
entre
sí
y
perpendiculares
a
la
superficie
electródica
(Figura
6),

aumentando
la
eficiencia
de
hibridación.

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