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ARTÍCULO

Diseño
de
un
genosensor
electroquímico
para
la
detección

indirecta
de
gluten
en
alimentos

Begoña
Martín
Fernández,
Carmen
Lorena
Manzanares
Palenzuela,
Marta

Sánchez-­-Paniagua
López,
Beatriz
López-­-Ruiz,
Gloria
Frutos
Cabanillas

Sección
Departamental
de
Química
Analítica.
Facultad
de
Farmacia.
Universidad
Complutense.

28040
Madrid.
Spain.

e-­-mail:
bealopru@farm.ucm.es

RESUMEN

Se
propone
un
nuevo
genosensor
electroquímico
para
la
detección
de
una
secuencia

específica
de
ADN
que
codifica
un
fragmento
inmunogénico
de
la
a-­-2-­-gliadina,

proteína
del
gluten
de
trigo
responsable
de
la
celiaquía.
El
diseño
del
genosensor
se

basa
en
la
formación
de
una
monocapa
autoensamblada
de
sonda
de
captura
y
un

agente
bloqueante,

mercaptohexanol,
sobre
electrodos
de
oro
serigrafiados.
Se

eligió
un
ensayo
tipo
sándwich,
utilizando
una
sonda
indicadora
marcada
con

biotina
y
el
conjugado
estreptavidina-­-fosfatasa
alcalina
como
molécula
de
marcaje.

La
detección
del
analito
se
basó
en
la
medida
de
la
corriente
de
oxidación
del
1-­-
naftol,
producto
formado
por
la
hidrólisis
enzimática
del
1-­-naftil-­-fosfato,
mediante

voltamperometría
de
pulso
diferencial.
Se
investigaron
y
optimizaron
los

parámetros
implicados
en
la
composición
de
la
fase
sensora
mediante
voltametría

cíclica,
encontrándose
como
relación
óptima
sonda
de
captura:mercaptohexanol

2µM:9mM.
Con
el
objetivo
de
minimizar
las
adsorciones
inespecíficas,
se

optimizaron
las
concentraciones
de
sonda
indicadora
y
conjugado
enzima-­-
estreptavidina,
especies
involucradas
en
la
fase
de
medida,
obteniéndose
como

valores
óptimos
1
µM
y
1,075x10-­-3
g/L
respectivamente.
El
genosensor
propuesto

presentó
una
respuesta
lineal
entre
20
y
250
nM.

Palabras
clave:
Genosensor;
Voltamperometría;
Monocapa
autoensamblada;

Gluten,
a-­-2-­-gliadina.

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