Page 8 - 74_02

MERITXELL NUS Y COLS. AN. R. ACAD. NAC. FARM.

es muy complicado, por lo que tampoco parece una buena solución
para sustituir al método de Eckerson y col. (12).

NUEVO MÉTODO PARA DETERMINAR
LA ACTIVIDAD ARILESTERASA

A) Estudios en humanos

Nuestro equipo se planteó que todos estos inconvenientes po-
drían solucionarse empleando un medio que reprodujera la compo-
sición del medio interno en el que trabaja la arilesterasa. El Simu-
lated Body Fluid (SBF), introducido por Kokubo y col. (23), es un
líquido artificial que presenta la misma concentración iónica del
suero y que ha sido utilizado con éxito en experimentos con bioma-
teriales (24, 25). No obstante, hasta el momento nunca había sido
utilizado para medir actividades enzimáticas. Como el SBF no tiene
exactamente la misma composición electrolítica que el suero, ya que
presenta 1,8 veces más cloruro y seis veces menos bicarbonato que
el suero, se diseñaron tres tampones más (Tabla 2) (26):

• SBFc: modificado en cloruro y tamponado con ácido 2-[4-(2-
hidroxietil-1-piperazino)]propilsulfónico (HEPES)/NaOH.

• SBFb: modificado en bicarbonato y tamponado con Tris/HCl.

• SBFp: con la misma composición que el plasma y tamponado
con HEPES/NaOH.

TABLA 2. Composición iónica del suero, del SBF y de los SBF modificados

Suero SBF SBFc SBFb SBFp

Na+ mM mM mM mM mM
142 142 142 142 142
Ca2+ 2,5 2,5 2,5 2,5 2,5
Cl– 103 187 103 187 103
4,6 4,6 4,6 5
K+ 5 4,6 4,6 27 27
27 1,5 1,5 1,5 1,5
HCO3– 1,5
Mg2+

186