Page 10 - 74_02
P. 10

MERITXELL NUS Y COLS.                     AN. R. ACAD. NAC. FARM.

se puede observar que el SBF da los mejores resultados, seguido del
SBFc. Las actividades obtenidas con los otros tampones SBFb y SBFp
fueron equivalentes a las observadas, empleando el método de Ecker-
son y col. (12).

TABLA 3. Pendiente de la actividad arilesterasa en cinco tampones diferentes

Tampón                 Pendiente  IC 95%     R2

Tris/HCl                U/L          U/L     0,987
   SBF                 15,53      13,8-17,3  0,989
  SBFc                 25,84      22,8-28,8  0,969
  SBFb                 21,97      18,0-25,9  0,983
  SBFp                 15,73      13,6-17,8  0,981
                       13,92      12,0-15,9

2. Obtención de los parámetros cinéticos
2. de la actividad arilesterasa

    Este ensayo se llevó a cabo a un volumen de enzima fijo (50 µL
de suero humano control) y variando la concentración de sustrato
(0,10-0,50 mM de acetato de fenilo) en tampón SBF (con el que se
habían obtenido los mejores resultados) (22) y con el método de
Eckerson y col. (12).

    Por ambos métodos el enzima mostró una cinética de Michaelis-
Menten. Los valores de Km y Vmax: obtenidos con el método de
Eckerson y col. (12) fueron los siguientes: Vmax = 5,299*10–5 U (IC
95% = 4,18 *10–5 – 6,42*10–5 U) and Km = 2,765*10–4 M (IC 95% =
1,62*10–4 – 3,91*10–4 M) y por el nuevo método (26) usando SBF
Vmax = 6,305*10–5 U (95% IC = 4,62 *10–5 – 7,99*10–5 U) y Km =
2,643*10–4 M (95% IC = 1,13*10–4 – 4,16*10–4 M).

3. Validación del nuevo método en 23 pacientes
3. con riesgo cardiovascular incrementado

    Los criterios de inclusión eran: edad: hombres > 45 años; muje-
res postmenopáusicas (> 50 años); Índice de masa corporal (IMC)

188
   5   6   7   8   9   10   11   12   13   14   15