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VOL. 74 (2), 229-256, 2008 DISEÑO Y DESARROLLO DE NUEVAS...

ministradas por la casa comercial en forma de solución metanólica,
fue necesaria la eliminación del disolvente mediante rotaevapora-
ción (23 mbar, 143 r.p.m.) durante 20 minutos. El film de polímero
obtenido se secó a vacío durante dos horas y posteriormente se hi-
drató con BHG.

2.3. Determinación del tamaño y potencial zeta

El tamaño y potencial zeta se midieron por difractometría de
láser en un Zetasizer Nano Series (Malvern Instruments, Reino
Unido). Para ello, se diluyeron 200 µL de complejo en 1 mL de agua
bidestilada. Las medidas se realizaron por triplicado.

2.4. Microscopia de fuerza atómica (AFM)

Se prepararon complejos con PAMAM G5 a una relación de carga
10/1 en BHG. Tras depositar un pequeño volumen de los complejos
sobre una superficie de mica, se dejaron secar al aire. Las imágenes
fueron tomadas en un Cervantes AFM System (Nanotec Electróni-
ca, S. L., España). Se han utilizando cantilevers Nanosensor NCH-W.
Las medidas se realizaron en modo dinámico.

2.5. Estudios de condensación

En una placa de 96 pocillos se añadieron 1,5 µg de DNA y 0,17 µg
de bromuro de etidio por pocillo, es decir, a una relación molar 10:1
(DNA: Bromuro de etidio). A continuación se añadieron cantidades
crecientes de dendrímero y BHG hasta 300 µL de volumen total en los
pocillos y se incubaron 10 minutos en la oscuridad. La concentración
de pDNA fue de 5 µg/mL. La fluorescencia emitida se determinó, tras
dos horas de incubación, mediante un espectrofluorímetro Genios
(Tecan, Austria) a una longitud de onda de excitación de 540 nm y una
longitud de onda de emisión de 580 nm. La fluorescencia relativa de
cada muestra se calculó de la siguiente manera:

Fr = (Fobs - Fe )× 100 )

(F0 - Fe

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