Page 68 - 74_02
P. 68

GEMMA NAVARRO DÍEZ Y C. TROS DE ILARDUYA  AN. R. ACAD. NAC. FARM.

3. Microscopía de Fuerza Atómica (AFM)

    La Figura 1 muestra la imagen obtenida por AFM de los comple-
jos preparados con PAMAM G5 a una relación de carga 10/1. Se
observan que los complejos son compactos y con una morfología
redondeada. No se detectaron moleculas libres de DNA, lo que deter-
mina que la mayoría del plásmido está condensado.

     FIGURA 1. Imágenes AFM (4,3 µm × 4,3 µm) de los complejos G5/DNA
                                     a una relación de carga 10/1.

4. Ensayo de condensación

    Para estudiar el proceso de condensación del DNA en los comple-
jos, se evaluó la capacidad de las generaciones G4 y G5 para despla-
zar a un agente intercalante, el bromuro de etidio, en su unión con
el DNA.

    Como se observa en la Figura 2, la curva de condensación de
ambas generaciones es similar. A medida que se añaden cantidades
crecientes de dendrímero, la fluorescencia relativa debida a la unión
del DNA con el bromuro de etidio va disminuyendo, hasta alcanzar
el grado máximo de condensación a una relación de carga de 4/1
para PAMAM G4 y de 2/1 para PAMAM G5.

246
   63   64   65   66   67   68   69   70   71   72   73