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A. GARRIDO, J.M BAUTISTA ANAL. REAL ACAD. NAL. FARM.

secuencia MVARGDL donde se encuentra el Asp339 uno de los ligandos a
los que se une el Mn2+ (35), y por el que, como se sabe, la enzima tiene un
requerimiento absoluto. Es lógico pensar que el cambio altere la actividad de
la enzima. Las mutaciones A1150G, G1154A y G1174A originan los
cambios sustitutivos de Thr384oAla, Arg385oLys y Ala392oThr,
respectivamente, en posiciones y en una región extraordinariamente
conservados. Esta región se encuentra entre los aminoácidos Thr371, Gln372
y Glu406 los cuales participan en el proceso catalítico activamente. Así, en
el transcurso del mismo, los dos sustratos de la enzima, PEP y ADP, se unen
al K+, el cual a su vez se enlaza a la Gln372 y al Glu406. (33). Por su parte el
Thr371 junto con la Lys313 posicionan y orientan el PEP en el centro activo
(35). Por ello, es razonable que la sustitución aminoacídica en cualquiera de
las tres posiciones conlleve graves consecuencias en el proceso catalítico.

Las mutaciones C1456T, C1492T y G1529A que originan los cambios
Arg486oTrp, Arg498oTrp y Arg510oGln, respectivamente, se encuentran
relativamente próximos en la secuencia aminoacídica de la enzima. Van
Solinge y col. (62) sugieren que la arginina en la posición 486 forma enlaces
de hidrógeno con otros residuos aminoacídicos adyacentes en la estructura
terciaria y que su sustitución ocasionaría graves alteraciones en la misma. Sin
embargo, la posición no se encuentra bien conservada y en la de rata, cuya
homología con la de humana es más del 99%, se encuentra sustituida por la
glutamina, por ello no es lógico pensar que las conformaciones de esas dos
enzimas sean muy diferentes. Lo mismo se podría argumentar en la sustitu-
ción de la arginina en la posición 498, pero además en este caso como
veremos más adelante, el aminoácido se encuentra alejado del centro activo y
otros aminoácidos con los que potencialmente pudiera formar enlaces de
hidrógeno, por lo que no parece que este cambio pudiera alterar significati-
vamente la estructura terciaria de la enzima.

La sustitución de glutamina por arginina en la posición 510 ha sido bien
estudiada por Van Solinge y col. (63). Según estos investigadores la sustitu-
ción conduce a la formación de un nuevo enlace de hidrógeno que no aparece

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