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194ANALESRANFwww.analesranf.coman. r.acad. Farm.vol. 91. n%u00ba2 (2025) %u00b7 pp. 193-2061. INtrodUCCI%u00d3NLas metaloproteinasas de matriz (MMP) sonuna familia de metaloenzimas proteol%u00edticas,dependientes de zinc, presentes intracelularmente y unidas a membrana. Estas prote%u00ednasest%u00e1n implicadas en la degradaci%u00f3n de la matriz extracelular (ECM), tanto en procesos fisiol%u00f3gicos, como en el desarrollo embrionario,la reproducci%u00f3n y la remodelaci%u00f3n tisular, adem%u00e1s de en procesos patol%u00f3gicos, como las enfermedades inflamatorias, el crecimientotumoral y la met%u00e1stasis (1,2).En particular, la MMP-9 es una de lasprincipales integrantes de esta familia deprote%u00ednas. Mayoritariamente, se sintetiza enforma de zim%u00f3geno, de unos 92 kDa y, tras suhidr%u00f3lisis, la MMP-9 se activa adquiriendo lacapacidad de escindir prote%u00ednas de lasuperficie celular y del ambiente extracelular,degradar componentes de la ECM y, porconsiguiente, alterar las interacciones c%u00e9lulac%u00e9lula y c%u00e9lula-ECM (3,4).Todos estos procesos mencionados est%u00e1n estrechamente relacionados con las diferentesetapas de la progresi%u00f3n del c%u00e1ncer, incluyendola migraci%u00f3n e invasi%u00f3n de las c%u00e9lulas tumorales, la met%u00e1stasis, la angiog%u00e9nesis y la inflamaci%u00f3n. Adem%u00e1s, en diversos estudios se haobservado un aumento de su sobreexpresi%u00f3n yactivaci%u00f3n en tumores malignos. (5) El rangode concentraci%u00f3n fisiol%u00f3gico de MMP-9 en suerohumano, var%u00eda seg%u00fan la literatura revisada, encontr%u00e1ndose entre 10 y 150 ng/mL aproximadamente y, en situaciones patol%u00f3gicas, puedeLabel-free electrochemical inmunosensor formetaloproteinase 9 determinationIrene Charneco, Marta S%u00e1nchez, et al.elevarse a 500 ng/mL (6%u20139). Todo esto lo convierte en un biomarcador potencial en el contexto del c%u00e1ncer (10).Considerando lo anteriormente mencionado, explorar esta prote%u00edna como un prometedor biomarcador y sus m%u00e9todos dedetecci%u00f3n, podr%u00eda convertirse en una valiosaherramienta para el diagn%u00f3stico cl%u00ednico.Actualmente, existen numerosos m%u00e9todosbioanal%u00edticos para la detecci%u00f3n de proteasascomo MMP9, incluyendo el ensayo por inmunoadsorci%u00f3n ligado a enzimas (ELISA), el Western Blot y la zimograf%u00eda. Estos m%u00e9todos secaracterizan por requerir un tiempo de an%u00e1lisis elevado, ser costosos y dif%u00edciles de operar,requiriendo personal capacitado (11,12). Considerando estas desventajas, se plantea el usode nuevos m%u00e9todos de an%u00e1lisis, siendo los biosensores m%u00e9todos anal%u00edticos prometedorespara este fin como consecuencia de sus excelentes propiedades anal%u00edticas.Los biosensores son dispositivos anal%u00edticoscompactos que se componen de un elementode reconocimiento biol%u00f3gico asociado a untransductor f%u00edsico-qu%u00edmico. Este %u00faltimo seencarga de procesar la se%u00f1al biol%u00f3gicagenerada al interaccionar el elemento dereconocimiento y el analito, transformarla enuna se%u00f1al el%u00e9ctrica f%u00e1cil de cuantificar yrelacionarla con la concentraci%u00f3n de analito(13,14).En la literatura se han propuesto diferentesbiosensores electroqu%u00edmicos para ladeterminaci%u00f3n de MMP9, mediante el uso deetapa de marcaje (15, 16) y en ausencia deconstruction of the immunosensor, an electrografting methodology is usedto modify the surface of the screen-printed electrode, followed byactivation by EDC/NHSS, which allows specific immobilization of thecapture antibody and blocking of non-reactive sites with bovine serumalbumin. The correct modification of the electrode surface in the biosensorpreparation steps was confirmed by cyclic voltammetry andelectrochemical impedance spectroscopy. The quantitative analysis wascarried out by square wave voltammetry, obtaining an accurate biosensorplatform (1 ng/mL CV=10%; 50 ng/mL CV=5%), high sensitivity (2,85%u00b5A%u00b7mL/ng), low detection limit (0.301 ng/mL), and excellent recoveryresults (1 ng/mL 95%; 10 ng/mL 109,2%, 100 ng/mL 96,5%).