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ANALESRANFwww.analesranf.com193 an. r. acad. Farm.vol. 91. n%u00ba 2 (2025) %u00b7 pp. 193-206art%u00edCUlo de INvestIGaCI%u00d3NInmunosensor electroqu%u00edmico libre de marcaje para la detecci%u00f3n demetaloproteinasa 9label-free electrochemical inmunosensor for metaloproteinase 9determinationIrene Charneco-Pe%u00f1a, Marta S%u00e1nchez-Paniagua, Esther S%u00e1nchez-Tirado, Araceli Gonz%u00e1lez-Cort%u00e9s,Paloma Ya%u00f1ez-Sede%u00f1o y Beatriz L%u00f3pez-Ruiz.Departamento de Qu%u00edmica en Ciencias Farmac%u00e9uticas de la Facultad de Farmacia. Departamento de Qu%u00edmica Anal%u00edtica de la Facultad de Ciencias Qu%u00edmicas de la Universidad Complutense de Madrid.e-mail: bealopru@ucm.esArt%u00edculo premiado con el Premio ASISA en el concurso cient%u00edfico RANF 2024Recibido el 7 de noviembre de 2024; aceptado el 12 de diciembre de 2024Disponible en internet el 30 de junio de 2025resUMeNLas metaloproteinasas de matriz son enzimas clave en una variedad deprocesos fisiol%u00f3gicos y patol%u00f3gicos, destac%u00e1ndose su papel en la progresi%u00f3ntumoral. En particular, la metaloproteinasa-9 ha emergido como unbiomarcador relevante en el diagn%u00f3stico y pron%u00f3stico oncol%u00f3gico. Elpresente estudio se centra en el desarrollo de un inmunosensorelectroqu%u00edmico libre de marcaje para la detecci%u00f3n de metaloproteinasa-9.La construcci%u00f3n del inmunosensor implica la modificaci%u00f3n de la superficiede un electrodo serigrafiado mediante electrografting seguido de unaactivaci%u00f3n mediante EDC/NHSS, lo cual permite la inmovilizaci%u00f3n espec%u00edficadel anticuerpo de captura y el bloqueo de sitios no reactivos conseroalb%u00famina bovina. La correcta modificaci%u00f3n de la superficie electr%u00f3dicaen las etapas de preparaci%u00f3n del biosensor se confirm%u00f3 mediantevoltamperometr%u00eda c%u00edclica y espectroscopia de impedancia electroqu%u00edmica.El an%u00e1lisis cuantitativo se llev%u00f3 a cabo mediante voltametr%u00eda de ondacuadrada obteniendo una plataforma biosensora precisa (1 ng/mL CV=10%;50 ng/mL CV=5%), de alta sensibilidad (2,85 %u00b5A%u00b7mL/ng), bajo limitedetecci%u00f3n (0,301 ng/ml), y excelentes resultados de recuperaci%u00f3n (1 ng/mL95%; 10 ng/mL 109,2%, 100 ng/mL 96,5%).abstraCtMatrix metalloproteinases (MMPs) are enzymes involved in physiologicaland pathological processes, including cancer progression. In particular,MMP9 is positioned as a relevant biomarker in cancer diagnosis andprognosis. This project presents the development of a label-freeelectrochemical immunosensor for the detection of MMP9. For thePalabras ClaveInmunosensor electroqu%u00edmicoMetaloproteinasa 9Graftingelectroqu%u00edmicoDiagn%u00f3sticoBiomarcadoresDOI:https://doi.org/10.53519/analesranf.ISSN: 1697-4271 E-ISSN: 1697-428X/Derechos Reservados %u00a9 2025 Real Academia Nacional de Farmacia. Este es un art%u00edculo de acceso abierto A N A L E S D E L AR E A L A C A D E M I AN A C I O N A L D E F A R M A C I AKeywords Electrochemical immunosensorMetalloproteinase 9ElectrochemicalgraftingDiagnosticBiomarkersInmunosensor electroqu%u00edmico libre de marcajepara la detecci%u00f3n de metaloproteinasa 9Irene Charneco, Marta S%u00e1nchez, et al.