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186ANALESRANFwww.analesranf.coman. R. acad. Farm.vol. 91. n%u00ba2 (2025) %u00b7 pp. 173-192The non-replicative DNA vaccine, pPAL-S + pPAL-N,free of antibiotic resistance genes, confers completeprotection in mice against SARS-CoV-2Pedro J. Alcolea, Jaime Larraga et al.Figura 6. la vacuna pPal-Sfs + pPal-N confiere una protecci%u00f3n total contra el desaf%u00edo con 105 PFU del aislado Mad6 delSaRS-Cov-2 en el modelo murino K18-haCE2. (a) titulaci%u00f3n de anticuerpos circulantes anti-Rbd Igg, Igg1, Igg2c yneutralizantes 15 d%u00edas despu%u00e9s de la inmunizaci%u00f3n de cebado/refuerzo con pPal-Sfs + pPal-N. (b) Evoluci%u00f3n del peso corporaldespu%u00e9s de 105 PFU SaRS-Cov-2 desaf%u00edo. los animales vacunados mantuvieron su peso durante todo el experimento. Elpeso disminuy%u00f3 en el grupo control hasta que se tuvo que aplicar el criterio de valoraci%u00f3n (20% de p%u00e9rdida de peso). (C)Seguimiento de signos cl%u00ednicos despu%u00e9s de la provocaci%u00f3n. (d) Reducci%u00f3n de la carga viral en los %u00f3rganos diana. (Ct queexplica los niveles de aRNm del SaRS-Cov-2. b-actina fue el gen de referencia. (E) Reducci%u00f3n de la replicaci%u00f3n viral (PFU/gde tejido) en c%u00e9lulas vERo. la inferencia estad%u00edstica se realiz%u00f3 mediante la prueba t de Student aplicando el ajuste del valorp por el m%u00e9todo de Holm-Sidak (( = 0,05; *p<0,05; **p<0,01; ***p<0,001).