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para generar modelos animales que replicanenfermedades humanas, lo que permiteestudiar la funci%u00f3n de genes espec%u00edficos yprobar nuevas terapias. Sin embargo, a pesarde su gran potencial, la terapia g%u00e9nica basadaen CRISPR/Cas a%u00fan presenta limitaciones,incluidas aquellas relacionadas con laseguridad, la especificidad y los posiblesefectos fuera del objetivo (efectos offtarget), que deben resolverse (46).1.9. Nuevas terapias avanzadasLas terapias avanzadas han revolucionado elcampo de la medicina, proporcionando nuevasestrategias terap%u00e9uticas que van m%u00e1s all%u00e1 delas terapias convencionales. %u00c9stas incluyen laterapia g%u00e9nica, la terapia celular y la medicinaregenerativa, dirigidas a abordarenfermedades complejas que carecen detratamientos efectivos. Se basan en genes oc%u00e9lulas (advanced therapy medicinal products,ATMPs), que han abierto la puerta atratamientos personalizados, ajustados a lasnecesidades individuales de los pacientes, yabriendo el paradigma hacia una medicinaindividualizada (47).La terapia celular implica el uso de c%u00e9lulasvivas para tratar enfermedades o reparartejidos da%u00f1ados, que han sido m%u00ednimamentemanipuladas o procesadas ex vivo mediantepropagaci%u00f3n, expansi%u00f3n, selecci%u00f3n,tratamiento farmacol%u00f3gico o alguna otramodificaci%u00f3n de sus caracter%u00edsticas biol%u00f3gicas.Conlleva el trasplante de c%u00e9lulas de undonante (terapia alog%u00e9nica) o del propiopaciente (terapia aut%u00f3loga), o incluso enalgunos casos de forma xenog%u00e9nica (de otraespecie). As%u00ed, las c%u00e9lulas madremesenquimales (MSCs), han mostrado un granpotencial en la regeneraci%u00f3n tisular y en lamodulaci%u00f3n del sistema inmunol%u00f3gico (48). Enel %u00e1mbito de las coagulopat%u00edas, las c%u00e9lulasiPSCs muestran interesantes posibilidades paracorregir deficiencias en factores de lacoagulaci%u00f3n, abriendo nuevas posibilidadesterap%u00e9uticas para enfermedades como lahemofilia (49).Cas9 es una endonucleasa, lo que significaque puede cortar las cadenas de ADN en unsitio espec%u00edfico. Esta especificidad es dirigidapor un ARN gu%u00eda que se empareja con lasecuencia diana en el ADN, permitiendo a Cas9realizar un corte preciso en el genoma,concretamente en la secuencia PAM(protospacer adjacent motif; motivoadyacente al protoespaciador), que se tratade una secuencia de nucle%u00f3tidoscomplementaria al ARN gu%u00eda que va a indicara la prote%u00edna Cas d%u00f3nde %u201ccortar%u201d (43). Estecorte desencadena mecanismos de reparaci%u00f3ndel ADN en la c%u00e9lula, que pueden seraprovechados para introducir mutaciones ocorregir secuencias defectuosas. El sistemaCRISPR/Cas es altamente modular, lo quesignifica que puede ser adaptado a diferentesprop%u00f3sitos de edici%u00f3n g%u00e9nica. Al cambiar lasecuencia del ARN gu%u00eda, es posible dirigir laprote%u00edna Cas a diferentes partes del genoma,permitiendo la edici%u00f3n simult%u00e1nea dem%u00faltiples genes. La uni%u00f3n de extremos nohom%u00f3logos (Non- Homologous End Joining,NHEJ) es uno de los principales mecanismos dereparaci%u00f3n del ADN que se activa tras el corteinducido por Cas en el genoma o para realizarreparaciones de errores que ocurren de formanormal en c%u00e9lulas que no se encuentran endivisi%u00f3n (44). La Reparaci%u00f3n Dirigida porHomolog%u00eda (Homology-Directed Repair, HDR)es otro mecanismo de reparaci%u00f3n del ADN quese activa despu%u00e9s de un corte de la doblehebra inducido por Cas o en c%u00e9lulas endivisi%u00f3n. A diferencia de NHEJ, HDR utiliza unasecuencia de plantilla hom%u00f3loga comoreferencia para reparar la rotura, lo quepermite la correcci%u00f3n precisa de mutacioneso la inserci%u00f3n de secuencias espec%u00edficas en elgenoma. Sin embargo, HDR es menos eficienteque NHEJ y solo ocurre durante ciertas fasesdel ciclo celular, lo que limita su uso enalgunas aplicaciones de edici%u00f3n g%u00e9nica 45).CRISPR/Cas ha encontrado una amplia gamade aplicaciones en biolog%u00eda y medicina, desdela creaci%u00f3n de modelos animales hasta laterapia g%u00e9nica y la biotecnolog%u00eda agr%u00edcola. Enla investigaci%u00f3n biom%u00e9dica, CRISPR se utiliza30ANALESRANFwww.analesranf.comD%u00e9ficit de factor V y terapias avanzadasAntonio Liras et al.An. R.Acad. Farm.Vol. 91. n%u00ba1 (2025) %u00b7 pp. 17-44