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Javier Gualix et al.
motivación o recompensa (121-124), la neurotransmisión
purinérgica podría participar en estas vías. Así mismo, la
transmisión purinérgica podría jugar un papel en
VNUT/DAPI BIII-Tubulina/DAPI VNUT/BIII-Tubulina/DAPI
Hc
Cb
Figura 8. Identificación de VNUT en distintas poblaciones neuronales. Microfotografías representativas que muestran la
presencia de VNUT (rojo) en cultivos de neuronas de hipocampo (Hc) y de neuronas granulares de cerebelo de ratón (Cb) a
día 7 in vitro. Las neuronas se marcaron con la proteína citoesquelética ßIII-tubulina (verde) y los núcleos se tiñeron con
DAPI (azul). Escala 20 µm.
VNUT también podría estar implicado en los procesos
de diferenciación neural y elongación axonal. En neuronas
de hipocampo embrionario, que presentan receptores P2X7
funcionales localizados principalmente en el cono de
crecimiento axonal, la presencia de ATP extracelular, y su
efecto sobre los receptores P2X7, reduce el crecimiento
del axón. En contraste, tanto la degradación del ATP por
acción de ectonucleotidasas, como el silenciamiento de la
expresión del receptor P2X7 o su bloqueo farmacológico,
incrementa la longitud axonal (126). La presencia de ATP
extracelular está ligada a su almacenamiento vesicular y su
disponibilidad para ser liberado, lo que sugiere un papel
del trasportador vesicular VNUT en los procesos de
neuritogénesis y diferenciación neuronal. En este sentido,
se ha analizado el efecto de la expresión o silenciamiento
de VNUT en el proceso de neuritogénesis que ocurre en
las células de neuroblastoma Neuro-2a tras el tratamiento
con ácido retinoico. La expresión de VNUT reduce el
número y la longitud de las neuritas en estas células, un
efecto que es revertido por el silenciamiento de la
expresión de este transportador (127).
Los astrocitos y la microglía son otros tipos celulares
que secretan ATP en el cerebro. La liberación de ATP por
los astrocitos puede inducir la propagación de ondas de
calcio en estas células gliales y modular la actividad de las podría incrementar la liberación exocitótica de ATP
neuronas (128-130). Sin embargo, los mecanismos que
regulan la liberación de ATP por estas células no son bien
30 @Real Academia Nacional de Farmacia. Spain
desórdenes neurológicos que implican la desregulación de
neuronas dopaminérgicas en la substantia nigra, como es la
enfermedad de Parkinson (125).
conocidos, habiéndose descrito en los astrocitos una
liberación de ATP tanto dependiente como independiente
de Ca2+. La liberación de ATP dependiente de Ca2+ de los
astrocitos podría utilizar un mecanismo similar a la
exocitosis regulada por Ca2+ de las vesículas sinápticas. De
hecho, la liberación de ATP es dependiente del incremento
en la concentración intracelular de Ca2+ y los astrocitos
poseen varios tipos de vesículas secretoras, incluyendo
vesículas de tipo sináptico, vesículas de núcleo denso y
lisosomas secretores (131). En astrocitos corticales, VNUT
se localiza principalmente en los lisosomas secretores,
llevando a cabo el almacenamiento de ATP en estos
orgánulos. La inhibición de VNUT por Evans blue, así
como la reducción de su expresión mediante el uso de
ARN de interferencia, reduce la cantidad de ATP liberada
de manera dependiente de Ca2+ por los astrocitos, mientras
que la sobreexpresión de VNUT incrementa dicha
liberación (132). En el caso de la microglía, la localización
de VNUT difiere, ya que no se ha observado su presencia
en los lisosomas (133). Además, en la línea celular
microglial MG5, la expresión del transportador aumenta
tras el tratamiento con el lipopolisacárido bacteriano
(LPS), produciéndose una mayor liberación de ATP (133).
Este hecho es de suma importancia, ya que en situaciones
como daño cerebral traumático o infección, la microglía
mediante el aumento de la expresión de VNUT. Se ha