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P. 76

J.	
  R.	
  Lacadena	
                                                                                                                	
  

	
  
                  prematura	
   del	
   citoplasto,	
   mejorando	
   el	
   desarrollo	
   de	
   embriones	
  
                  SCNT.	
   Así,	
   los	
   ovocitos	
   humanos	
   se	
   mantuvieron	
   en	
   presencia	
   de	
  
                  cafeína	
  1,25	
  nM	
  durante	
  la	
  eliminación	
  del	
  huso	
  del	
  ovocito	
  MII	
  y	
  la	
  
                  fusión	
  celular	
  somática.	
  	
  

             b. A	
   partir	
   de	
   8	
   ovocitos	
   de	
   una	
   donadora	
   (A)	
   se	
   obtuvieron	
   5	
  
                  blastocistos	
  	
  	
  SCNT	
  de	
  los	
  que	
  derivaron	
  4	
  líneas	
  NT-­-ESC.	
  Las	
  células	
  
                  donadoras	
  fusionadas	
  eran	
  fibroblastos	
  dermales	
  de	
  fetos	
  femeninos	
  
                  sincronizados	
  en	
  fase	
  G0/G1.	
  

             c. Para	
  comprobar	
  la	
  reproducibilidad	
  de	
  la	
  técnica	
  se	
  utilizaron	
  15	
  y	
  5	
  
                  ovocitos	
  de	
  otras	
  dos	
  mujeres	
  donantes	
  (B)	
  y	
  (C),	
  respectivamente,	
  y	
  
                  como	
   células	
   somáticas	
   a	
   fusionar	
   en	
   ambos	
   casos	
   fibroblastos	
  
                  epiteliales	
   de	
   un	
   paciente	
   con	
   síndrome	
   de	
   Leigh	
   (enfermedad	
  
                  mitocondrial).	
   Se	
   obtuvieron	
   4	
   y	
   3	
   blastocistos	
   de	
   la	
   procedencias	
  
                  (B)	
  y	
  (C),	
  respectivamente,	
  y	
  una	
  línea	
  NT-­-ESC	
  en	
  cada	
  caso.	
  	
  

             d. Con	
   el	
   fin	
   de	
   evaluar	
   la	
   posibilidad	
   de	
   utilizar	
   en	
   la	
   terapia	
  
                  regenerativa	
  del	
  futuro	
  las	
  células	
  NT-­-ESC	
  obtenidas	
  con	
  las	
  técnicas	
  
                  mencionadas,	
   se	
   comprobó	
   la	
   pluripotencia	
   de	
   tales	
   líneas	
   celulares	
  
                  examinando	
   la	
   expresión	
   de	
   marcadores	
   genéricos	
   de	
   células	
  
                  troncales	
   mediante	
   técnicas	
   inmunocitoquímicas	
   y	
   la	
   expresión	
   de	
  
                  los	
   factores	
   de	
   transcripción	
   OCT-­-4,	
   NANOG,	
   SOC2,	
   SSEA-­-4,	
   TRA-­-1-­-
                  60	
  y	
  TRA-­-1-­-81.	
  Asimismo	
  se	
  demostró	
  que	
  eran	
  capaces	
  de	
  originar	
  
                  tumores	
   con	
   representación	
   de	
   las	
   tres	
   capas	
   germinales	
  
                  embrionarias,	
  así	
  como	
  formar	
  de	
  manera	
  espontánea	
  en	
  cultivos	
  en	
  
                  suspensión	
  cardiomiocitos	
  que	
  tenían	
  pulsos	
  de	
  contracción.	
  

             e. Finalmente,	
  los	
  autores	
  recomiendan	
  que	
  los	
  ovocitos	
  que	
  se	
  utilicen	
  
                  en	
   experimentos	
   para	
   obtención	
   de	
   líneas	
   NT-­-ESC	
   deben	
   ser	
   de	
  
                  buena	
   calidad,	
   por	
   lo	
   que	
   recomiendan	
   que	
   no	
   se	
   deben	
   utilizar	
   las	
  
                  técnicas	
   convencionales	
   de	
   estimulación	
   ovárica	
   de	
   los	
   programas	
  
                  de	
   FIV,	
   sino	
   que	
   deben	
   establecerse	
   técnicas	
   específicas	
   con	
   dosis	
  
                  adecuadas	
  de	
  gonadotropinas	
  y	
  regímenes	
  de	
  supresión	
  de	
  pituitaria.	
  
                  Asimismo	
   recomiendan	
   hacer	
   determinados	
   estudios	
   genéticos	
   de	
  
                  las	
  posibles	
  donantes	
  de	
  ovocitos.	
  

4.	
  ASPECTOS	
  ÉTICOS	
  Y	
  LEGALES	
  
        Los	
   intentos	
   de	
   abrir	
   las	
   puertas	
   a	
   la	
   clonación	
   terapéutica	
   humana	
   puede	
  

que	
  resulten	
  innecesarios	
  si	
  llega	
  a	
  hacerse	
  una	
  realidad	
  clínica	
  la	
  reprogramación	
  
de	
   células	
   somáticas	
   adultas	
   utilizando	
   las	
   técnicas	
   de	
   Yamanaka	
   de	
   obtención	
   de	
  
las	
  células	
  iPS,	
  evitando	
  con	
  ello	
  la	
  obtención	
  y	
  destrucción	
  de	
  embriones	
  humanos.	
  
No	
   obstante,	
   Mitalipov	
   y	
   colaboradores	
   argumentan	
   que,	
   dado	
   que	
   los	
   embriones	
  
SCNT	
   apenas	
   si	
   tienen	
   presente	
   en	
   su	
   citoplasma	
   ADNmt	
   procedente	
   de	
   la	
   célula	
  

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