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VOL. 76 (4), 493-515, 2010 LA ENERGÍA DE ACTIVACIÓN COMO MARCADOR…
sí. Stein y cols. describieron un procedimiento para diferenciar los ti-
pos de macro-CK basado en sus diferentes Ea (12). Para la macro-CK
tipo 1 (CKBB-IgG) encontraron una Ea = 53 kJ/mol, semejante a la
CKBB (Ea = 58 kJ/mol). Para la macro-CK tipo 2 encontraron una Ea
= 142 kJ/mol, semejante a los valores obtenidos para la CK mitocon-
drial de corazón (142 kJ/mol) y músculo esquelético (130 kJ/mol). Las
comparación de los resultados obtenidos en 22 sueros normales, 31
macro-CK tipo 1 y 25 macro-CK tipo 2, permitió a estos autores con-
cluir que, tras la obtención por inactivación térmica (20 min a 45 ºC)
de una actividad catalítica residual > 50%, una Ea < 75 kJ/mol indi-
caría una macro-CK tipo 1, mientras una Ea > 75 kJ/mol una macro-
CK tipo 2 (12).
3. a-AMILASA (AMIL, EC 3.2.1.1)
La AMIL es una endoglicosidasa que forma parte de la secreción
exocrina del páncreas y las glándulas salivales. Presenta dos isoenzi-
mas, la pancreatrica (AMILP) y la salival (AMILS) codificadas por dos
genes distintos, si bien se pueden encontrar diferentes formas mole-
culares para cada una de las dos isoenzimas, como resultado de mo-
dificaciones post-traduccionales (desaminaciones, glicosilaciones o
deglicosilaciones).
Hafkenscheid y Hessels encontraron una considerable variación
para la Ea aparente de la AMIL sérica al utilizar distintos substratos,
y sugirieron que a esta variabilidad podría contribuir la distinta pro-
porción relativa de isoenzimas (13). En efecto, estos autores encon-
traron en 12 sueros unos valores medios para las Ea de la AMIL to-
tal de 40.7 kJ/mol, para la AMILP de 44.8 kJ/mol y para la AMILS de
38.1 kJ/mol (13). Las Ea obtenidas para las isoenzimas séricas son
análogas a las de las formas tisulares purificadas AMILP (45.0 kJ/mol)
y AMILS (40.1 kJ/mol) (14). El hecho de que no se encontrase una di-
ferencia significativa entre las Ea de las isoenzimas séricas y las for-
mas tisulares purificadas, demuestra la buena estabilidad de la AMIL
en el compartimento plasmático. Aunque la Ea de la AMILP es signi-
ficativamente mayor que la de AMILS, la magnitud de esta diferencia
no permitiría la evaluación termodinámica de la proporción relativa
de ambas isoenzimas en suero.
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