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A. BONORA-CENTELLES Y COLS. AN. R. ACAD. NAC. FARM.

Para investigar el impacto de la esteatosis en el proceso de aisla-
miento de los hepatocitos, se utilizaron biopsias quirúrgicas obteni-
das de 17 hígados humanos control no esteatósicos y 16 esteatósicos
(esteatosis > 40%). Los resultados muestran un rendimiento y una
viabilidad celular significativamente inferiores en los aislamientos de
hepatocitos de hígados con esteatosis (Tabla 2). El número de prepa-
raciones de hepatocitos que consiguió adaptarse con éxito al cultivo
fue inferior en el caso de hígados con esteatosis (100% cultivos satis-
factorios en el grupo control y 65% en hígados con esteatosis de gra-
do variable; Tabla 2).

Optimización del aislamiento de hepatocitos
a partir de órganos descartados para implante

Sobre la base de los resultados anteriores y la dilatada experiencia
de nuestro laboratorio en el aislamiento de hepatocitos a partir de
biopsias qurúrgicas (4) hemos tratado de optimizar el proceso de
aislamiento de hepatocitos para su aplicación a un órgano entero
(1,5-3,5 Kg) o un lóbulo completo (0,5-1 Kg). Se han realizado cinco
aislamientos de hepatocitos, lo que nos ha permitido establecer y op-
timizar las condiciones y protocolos. Los órganos con mayores nive-
les de esteatosis (esteatosis = 40%) dieron como resultado un menor
rendimiento celular en el proceso de aislamiento (Tabla 3). Los re-
sultados muestran una tendencia de que las menores viabilidades
obtenidas corresponden a los donantes de mayor edad (Tabla 3). En
general el rendimiento del proceso de disgregación de hígado o lóbu-
los enteros es inferior al obtenido con biopsias quirúrgicas (Tabla 2),
si bien es de destacar un mayor rendimiento en las muestras de me-
nor peso (un lóbulo) (Tabla 3).

Influencia de la esteatosis en la actividad de enzimas
de biotransformación en hepatocitos cultivados y en el hígado

Por una parte se investigó la influencia de la esteatosis en la
capacidad biotransformadora de hepatocitos procedentes de biop-
sias quirúrgicas de hígados con esteatosis. Los niveles de actividad
del P450 (ECOD; sustrato de varias isoformas del P450 y 6ß-OHT;

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