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LLUÍS MONTOLIU AN. R. ACAD. NAC. FARM.
FIGURA 2. Estrategia general para la obtención de una mutación específica
mediante la doble selección positiva y negativa, descrita por Mario Capecchi.
La incorporación de la mutación mediante recombinación y a través de las
regiones de homología de secuencias, bajo la selección positiva aplicada mediante
el gen de resistencia a la neomicina se complementa con la selección negativa,
para evitar inserciones al azar, asociada a la presencia del gen HSV-tk que
determina la mortalidad de la célula en presencia de ganciclovir (4).
En el artículo probablemente clave en la contribución de Mario
Capecchi a todas estas tecnologías (4), en el que demuestra que es
posible interrumpir, de forma específica, el gen HPRT con el gen de
resistencia a la neomicina, usando vectores de recombinación homó-
loga, tanto de inserción como de sustitución, el manuscrito lo con-
cluye con un párrafo premonitorio, símbolo de todos los desarrollos
y ratones knock-out que vendrían posteriormente. Dice así: «We have
demonstrated that we can inactivate by gene targeting a specific locus
in the mouse genome. The protocol we have developed to inactivate the
endogenous Hprt gene should be adaptable to other genes as well. We
have also shown that ES cells are a suitable host for gene targeting
experiments. It is hoped that this combination of using ES cells as the
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