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MARIANO ESTEBAN RODRÍGUEZ ANAL. REAL ACAD. NAC. FARM.

sión de un gran número de moléculas inmunomoduladoras (ej. IFN
tipo I, TNF-alfa, IL-12, OASL, MDA5, RIG), aunque MVA induce un
mayor número de genes que NYVAC. Estos datos han sido demos-
trados por microarrays conteniendo unos 20.000 genes humanos.
Hemos llevado a cabo una clasificación de los genes humanos, tanto
en células HeLa como en células dendríticas, que se activan en res-
puesta a cada uno de los virus, MVA y NYVAC (22-25). El análisis
detallado de la respuesta inmune inducida por MVA frente a los
distintos antígenos reveló una activación mayoritaria de células T
CD8+ mientras que NYVAC activó preferentemente células T CD4+
(Mooij y cols., manuscrito en prensa). Estos resultados demuestran
que tal y como habíamos planteado, MVA y NYVAC inducen res-
puestas inmunológicas diferentes. Existen varios factores que po-
drían explicar los diferentes mecanismos de inducción de la respues-
ta inmune. Evidencias recientes indican que tanto para la expansión
clonal de las células T CD8+, como para el desarrollo de sus funcio-
nes efectoras o el establecimiento de una población de memoria, es
necesario la presencia de una señal de citoquinas, denominada «ter-
cera señal» (26, 27).Esta tercera señal proviene de la secreción por
parte de la célula dendrítica madura de citoquinas como IL-12 y/o
IFN del tipo I (IFNa/ß), cuya activación es mediada por una cascada
de señalización distinta a la activada por el TCR y la molécula co-
estimuladora CD28. Si analizamos el perfil de genes activados tras la
infección con MVA de células dendríticas humanas (25) podemos
observar que existe un aumento significativo en la expresión a nivel
de ARN mensajero de genes como IL-12, IFN-a e IFN-ß, así como un
incremento del factor regulador del IFN IRF-7 y de proteínas impli-
cadas en la producción de IFN tipo I como RIG-I o MDA5. Conse-
cuentemente, se observa una mayor regulación de genes estimulados
por IFN (ISGs) como ISG56, ISG60 o SCYB10. Además, el programa
de diferenciación activado por la secreción de IL-12 junto con IFNa/
ß incrementa la expresión de un gran número de genes implicados
en otras funciones como el gen GADD45B (28) o el factor de trans-
cripción NFAT5 (29) que intervienen en la regulación de las células
efectoras; o genes implicados en la señal de transducción (MAP2K5)
y en la regulación del ciclo celular (Ciclina B1); o miembros de la
familia de los TNF (30). Todos ellos, se encuentran consistentemente
aumentados durante la infección por MVA. Además, otros genes
implicados en la modulación de la respuesta inmune como son las

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