Page 110 - 71_02
P. 110

MANUEL DOMÍNGUEZ CARMONA         AN. R. ACAD. NAC. FARM.

atóxica no hemaglutinante. Los complejos L (inicial de “large”) de 16S
están formados por la unión del complejo M con la proteína b de 7,2S
de 128.000 daltons, mas una gran cantidad de una proteína hemaglu-
tinante (Das Gupta y cols. 1966), al menos en los complejos de las
neurotoxinas A y D y probablemente en los de la B. La formación de
complejos M o L depende mucho de la concentración de iones Fe++;
si es de 1 mM los complejos M y L, se producen equimolecularmente,
pero si la concentración es de 10 mM predominan mucho los M. La
descomposición de los complejos, en otros menores aumenta la toxi-
cidad al concentrarse en ellos la toxina.

    Los agregados son macromoléculas que contienen como demues-
tra el microscopio electrónico una cadena de neurotoxina envuelta
por una hélice de hemaglutinina (Boroff y cols. 1972). La adición de
tripsina, al medio de pH 6,7 modifica ligeramente la estructura de
los agregados, quedando más accesible la toxina.

    La agregación dimérica de dos complejos L da un agregado tóxi-
co de 19S (unos 900.000 daltones) en el caso de la BoNT/A y de
500.000 para la BoNT/B, y de unos 350.000 (11 S) para la BoNT/E.
El agregado de 19S se retiene en las columnas de Sephadex de las
que se puede eluir con cloruro sódico obteniéndose una fracción la
a de 7,2 S con 150,000 d que es el 20% del total que contiene entre
3 a 5 veces mas neurotoxina que los cristales y poca hemaglutinina
y la ß que es el 80% que contiene poca neurotoxina y mucha hema-
glutinina. La hemaglutinina se reparte en diversos picos, al modifi-
car las condiciones de la elución (Das Gupta y cols. 1968).

    Otro agregado es el formado por unión de los complejos M y L
que forma cristales de 840.000 a 1.000.000 daltones, de unos 19S,
salvo la BoNT/C2 y laBoNT/G.

                                                      TABLA 1

Tipo                Composición

Complejo M          Toxina + proteína atóxica
Complejo L          Complejo M + proteína de 128.000 d + hemaglutinina
Agregados de L
Agregados de M y L

390
   105   106   107   108   109   110   111   112   113   114   115