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T. GIRBÉS JUAN AN. R. ACAD. NAC. FARM.

Las concentraciones de nigrina b libre que podrían alcanzarse en
la terapia con inmunotoxinas, en el caso de que se liberase totalmen-
te por hidrólisis en el plasma, son alrededor de 3 órdenes de mag-
nitud inferiores a estas. Por lo tanto, la nigrina b ofrece un margen
de seguridad excelente para su uso en la construcción de inmuno-
toxinas y en particular si se compara con la ricina.

Dominios proteicos de interacción con azúcares

Estudios recientes han permitido elucidar las estructuras de los
genes que codifican a ebulina l (44), nigrina b (45) y nigrina l (46)
y por lo tanto sus secuencias de amino ácidos. En el caso de la
ebulina l además se ha determinado la estructura molecular por
rayos X a la escala de 2.8 Å y encaja perfectamente con la determi-
nada a partir de la secuencia del gen correspondiente permitiéndose
además el estudio de la interacción estructural comparada de los
derivados de galactosa con los sitios de unión en la cadena B de la
ebulina y de la ricina (44).

Las cadenas B de las RIPs de tipo 2 cadenas poseen dominios
específicos de interacción con los azúcares. La cadena B de la ricina
posee dos dominios estructurales cada uno con tres subdominios
denominados a, ß y ?, de manera que existen 6 subdominios 1a, 1ß,
1?, 2a, 2ß y 2?, de los cuales solo los subdominios 1a y 2? tienen
capacidad contrastada por cristalografía y difracción de rayos X de
fijar galactósidos (47). Estudios recientes han permitido proponer
un tercer sitio (1ß) de unión de galactosa (48). Los datos cristalográ-
ficos indican que la ebulina l cristaliza en los sistemas ortorrómbico
y trigonal. El análisis comparado de las estructuras de la ebulina l
y de la ricina obtenidas por difracción de rayos X muestra que las
distribuciones espaciales son equivalentes en las dos proteínas.

Como se indica en la figura 4, la ebulina l presenta un resto de
Fen en la posición 248 en el subdominio 2? mientras que la ricina
presenta una Tir. Creemos que la substitución de Tir por Fen es
responsable de la menor afinidad de ebulina l por galactosa que la
ricina. Nigrina b y nigrina l poseen también Fen en la posición 248
y presentan similar toxicidad que la ebulina l. De hecho sabemos
que la ricina se fija 5.7 veces más que la nigrina b a las células Hela

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