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VOL. 67, (1) 2001 NUCLEOGÉNESIS

se encuentra rodeado de proteínas nucleares que secundariamente
dificultan la actuación de los factores de transcripción (Boyes y Bird,
1991). La hipometilación del DNA se consigue fácilmente por la
incorporación de 5-azacitidina, lo cual tiene lugar durante el periodo S del
ciclo. El resultado de los NORs de células humanas que han sido tratados
con 5-azacitidina aumentan de forma importante su actividad
transcripcional (Ferraro y Lavia, 1985) (124).

La valoración citológica de la dominancia de un NOR sobre otro
puede originarse por: i) detectar en el NOR del cromosoma metafásico
restos de proteínas tales como la nucleolina y otras que interactúan
físicamente sólo con aquellos NORs que han sido activos en la interfase
anterior (Hubble, 1985) (125), ii) por la eficacia que un NOR juega
durante el proceso de nucleologénesis que tiene lugar entre la telofase y
G1 del ciclo celular (De la Torre et al. 1975; Cabello et al., 1986); iii) por
el tamaño final del nucleolo (Martini y Flavell, 1985) (126).

La dominancia de un NOR sobre otro y su observación en
interfase puede ser total o parcial. Será total cuando se observa un
determinado nucleolo maduro en un NOR mientras el alelo carece de él;
será parcial cuando frente al nucleolo normal el de su alelo presenta un
tamaño reducido. Sin embargo, en este último caso, el tamaño reducido se
puede deber no a un equilibrio fisiológico entre dominancia y recesividad
sino a un desequilibrio estructural motivado por diferencia de tamaño en
los respectivos NORs (Stockert et al., 1969; Giménez-Martín et al., 1977).

El método empleado para obtener cromosomas aza-sustituidos
asimétricamente consistió en tratar durante un periodo S a las células con
5-azacitidina y cada cromátida estará monocatenariamente aza-sustituida.
Esperando a la división siguiente de estas células que han transitado por
el siguiente periodo S sin tratamiento de 5-azacitidina, de las dos
cromátidas de cada cromosoma, una sola poseerá una cadena aza-
sustituida y la otra cadena estará formada por DNA nativo, mientras su
cromátida hermana tendrá ambas cadenas nativas. Si al llegar a telofase
estas células son tratadas con 5 mM cafeína se inhibe la citocinesis y se
obtienen los dos núcleos resultantes de dicho protocolo en el mismo
citoplasma. Es decir, de las ocho cromátidas que poseen las células
binucleadas, dos se encuentran asimétricamente aza-sustituidas. La
emigración al azar en la anafase de las cromátidas puede originar que

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