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VOL. 66, (3) 2000 RIPS E INMUNOTOXINAS CONTRA EL CÁNCER

monoclonales para la fabricación de las inmunotoxinas es mucho menos
peligrosa que operando con la ricina.

Para investigar la citotoxicidad de una inmunotoxina construida
con ebulina y un anticuerpo monoclonal anti-endoglina, el anticuerpo
44G4, hemos utilizado como células blanco mioblastos de rata
transfectados con el gen de la endoglina humana en el laboratorio del Dr.
Carmelo Bernabeu. Estas células expresan endoglina humana y por lo
tanto pueden ser sensibles a nuestra inmunotoxina anti-endoglina.

Al estudiar la viabilidad celular frente a concentración de proteína,
pudimos determinar que las células parentales que no expresan endoglina
presentan la misma sensibilidad a la ebulina que a la inmunotoxina de
ebulina. Por el contrario las células transfectadas con el gen de la
endoglina humana son más sensibles a la inmunotoxina que a la ebulina.
La ventana entre toxina e inmunotoxina es de más de dos órdenes de
magnitud, pero como la muerte de una célula endotelial de la
neovasculatura tumoral acarrea la muerte de entre 100 y 250 células
tumorales, la ventana real puede ser de entre 10.000 y 25.000 (29).

En cuanto al mecanismo de internalización de la inmunotoxina,
aunque no está bien aclarado, creemos que la unión de la inmunotoxina a
la endoglina provoca la internalización de todo el complejo y una vez en
el citoplasma, el complejo podría seguir la vía de transporte retrógrado
desde el endosoma hasta el retículo endoplásmico rugoso en donde se
liberaría la cadena A de la ebulina al citosol e inhibiría la síntesis de
proteínas al inactivar los ribosomas. Este mecanismo comportaría la
detección de endoglina en vesículas de Golgi y en el retículo
endoplásmico rugoso.

Alternativamente, el complejo endoglina-inmunotoxina podría
simplemente provocar en el endosoma la translocación de la cadena A de
la ebulina al citosol, y alcanzándose los ribosomas se bloquearía con ello
la síntesis de proteínas. Ambas posibilidades abren una apasionante vía de
investigación para elucidar las etapas participantes en el tráfico
intracelular de esta inmunotoxina.

Las inmunotoxinas descritas hasta aquí están compuestas por una
RIP y un anticuerpo monoclonal frente a una molécula presente de
manera específica sólo o en mayor concentración en las células tumorales.

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