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PALOMA NAVARRO Y COLS. ANAL. REAL ACAD. FARM.

tras la estimulación con insulina, estudiamos el efecto de dos de las dianas
de la PI 3-quinasa: la p70S6-quinasa (p70S6k), y la proteína quinasa B
(PKB/Akt). Nuestros resultados mostraron que, aunque la p70S6k resultaba
fosforilada, y por tanto activada tras la estimulación con insulina, su
inhibición mediante el uso del inhibidor específico rapamicina, no
impedía el efecto protector de la insulina. Esto quedó comprobado tanto
por el estudio de la fragmentación del ADN, como por el porcentaje de
células hipodiploides.

Para estudiar el efecto de la Akt/PKB en nuestro sistema celular,
recurrimos a las transfecciones transitorias con construcciones
dominantes negativas o activas de Akt. Tras la realización de las
transfecciones, llevamos a cabo distintos ensayos que nos permitieron
confirmar la implicación de la Akt/PKB en la vía de señalización que
conduce a la supervivencia celular. Por una parte, la transfección con la
construcción permanentemente activa de Akt (PKBgag), produjo efectos
similares a los observados en presencia de insulina: disminución del
porcentaje de células con contenido en ADN inferior a 2C, y disminución
del número de núcleos apoptóticos. Sin embargo, la transfección con la
construcción dominante negativa de Akt (PKB-CAAX), bloqueó el
rescate inducido por la insulina, de una forma similar a como lo hacía el
inhibidor de PI 3-quinasa, LY294002, o la transfección con un dominante
negativo de la subunidad reguladora de la PI 3-quinasa, 'p85.

DISCUSIÓN

El BAT está especializado en la producción de calor por un
mecanismo denominado “termogénesis sin tiriteo”. Este tejido está activo
durante el periodo perinatal, tras la exposición al frío, tras los periodos de
hibernación o como respuesta a determinadas dietas. El desarrollo
embrionario del BAT requiere la existencia de un balance entre los
procesos de proliferación y apoptosis. No se conoce mucho sobre los
reguladores negativos del BAT, y de las señales implicadas en la
inactivación o desaparición del tejido. Recientemente se ha visto que el
TNF-Dcapaz de inhibir la diferenciación del tejido adiposo blanco, tiene
un papel importante como regulador negativo del BAT por diferentes

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