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VOL. 66, (3) 2000 APOPTOSIS EN ADIPOCITOS MARRONES

El balance entre la vida y la muerte requiere la presencia de
señales extracelulares (hormonas, citoquinas, factores de crecimiento). La
mayoría de las células en cultivo mueren por apoptosis en ausencia de
suero y/o factores de supervivencia, pero es posible prevenir esta muerte
celular mediante el aporte de factores específicos, como la insulina, IGF-
I, IGF-II, NGF, EGF (32,40,41,42). Considerando el alto número de
receptores de insulina e IGF-I presentes en las células MB 4.9.2 (25),
estudiamos el posible efecto de supervivencia que podrían ejercer estos
factores frente a la apoptosis inducida por retirada de suero.

La unión de la insulina/IGF-I a su receptor, da lugar a la
activación de distintas cascadas de señalización, a través de las cuales es
capaz de mediar en los procesos de proliferación, diferenciación y
apoptosis. La estimulación de la actividad PI 3-quinasa por insulina en los
adipocitos marrones primarios e inmortalizados, ya había sido demostrada
previamente (13,25). Nuestros resultados demostraron además que
wortmanina y LY294002 eran capaces de bloquear esta estimulación en
las células MB 4.9.2, a las mismas dosis que lo hacían en las células
primarias (25), y que este bloqueo impedía a la insulina ejercer su efecto
de protección frente a la apoptosis inducida por la retirada de suero. Tanto
la wortmanina como el LY294002 en presencia de insulina, disminuyeron
el porcentaje de células en ciclo, indicando que esta ruta era necesaria
para la progresión del ciclo celular y para la supervivencia de los
adipocitos marrones inmortalizados.

El papel de la ruta de Ras/Raf/MEK1/MAP-quinasa en apoptosis,
como sucede en otros casos es contradictorio. En líneas generales, se
implica a las MAP-quinasas en las rutas de supervivencia. Nuestros
resultados mostraron que el PD098058, inhibiendo la fosforilación de
MAP-quinasa, bloqueaba el rescate inducido por la insulina de una forma
similar a la wortmanina/LY294004, inhibidores de PI 3-quinasa. Dado
que la wortmanina no inhibe la estimulación de MAP-quinasas por
insulina, y que el PD098059 no afecta la actividad PI 3-K estimulada por
insulina, nuestros resultados demuestran claramente que la insulina lleva
a cabo su función como factor de supervivencia en los adipocitos

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