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70ANALESRANFwww.analesranf.comIModulation of the immune system to fight cancer usingCRISPR-Cas9, dependent or independent of CAR-TtechnologySamuel Torrej%u00f3n y Caroline WeinsteinAn. R. Acad. Farm.Vol. 91. n%u00ba1 (2025) %u00b7 pp. 67-82transfecci%u00f3n de un vector viral, utilizandolentivirus. Las c%u00e9lulas resultantes expresanreceptores espec%u00edficos CARs/TCRs en susuperficie y una vez aprobados los controlesde calidad y amplificaci%u00f3n celular, estas sonadministradas en el paciente v%u00eda infusi%u00f3n paraejercer su capacidad antitumoral (17-18). Dentro de las ventajas de esta tecnolog%u00eda seobserva que es mejor que otras terapiasinmunol%u00f3gicas, debido a que requiere de unainfusi%u00f3n de dosis %u00fanica y en caso de que elc%u00e1ncer vuelva, puede reactivarse la memoriainmunol%u00f3gica. Las desventajas son que: a) s%u00f3loest%u00e1 aprobada para c%u00e1nceres hematol%u00f3gicos,b) que presenta un costo de referencia que vadesde los 373 mil d%u00f3lares, c) las toxicidadesasociadas al tratamiento y d) la reca%u00edda de lostumores con ant%u00edgeno negativo. Para laproducci%u00f3n de esta terapia, CAR-T, se utilizaun vector viral, lo que significa un aumento enel tiempo de producci%u00f3n de la terapia, y porende, el costo de la terapia aumenta (19-20).Por esta raz%u00f3n, se han investigado otrastecnolog%u00edas para producir c%u00e9lulas T aut%u00f3logas(20).1.4. Tecnolog%u00eda de edici%u00f3n CRISPR-Cas9 Por otra parte, la tecnolog%u00eda de repeticionespalindr%u00f3micas cortas agrupadas yregularmente interespaciadas (CRISPR por sussiglas en ingl%u00e9s), es una tecnolog%u00eda de edici%u00f3ngen%u00f3mica que simula a una tijera molecularpersonalizada, usada por los cient%u00edficos paraeditar genomas (21).El mecanismo de CRISPR consiste en que laestructura sint%u00e9tica de secuencia de ARN gu%u00edaincluida en la ribonucleoprote%u00edna (sgRNA porsus siglas en ingl%u00e9s), dirige a la endonucleasaCas9 a una secuencia de ADN, con el objetivode causar una rotura de doble cadena (DSB porsus siglas en ingl%u00e9s) en el genoma. El DSBgenerado por dos dominios distintos de lanucleasa Cas9 es sujeto a mecanismos dereparaci%u00f3n del ADN mediados por elhospedero, que en ausencia de una plantillade reparaci%u00f3n, ocurrir%u00e1 por medio de unauni%u00f3n de extremos no hom%u00f3logos (NHEJ por sussiglas en ingl%u00e9s), lo que provoca inserciones ydeleciones aleatorias (21-22).Por otro lado, en presencia de una plantilladonante, puede iniciar la v%u00eda de reparaci%u00f3ndirigida por homolog%u00eda (HDR por sus siglas eningl%u00e9s), libre de errores, para crear lasmutaciones deseadas mediante recombinaci%u00f3nhom%u00f3loga, lo que constituye la base parallevar a cabo modificaciones precisas degenes, permitiendo realizar inserciones(knock-in) o eliminaciones (knock-out) (21-22).Debido a las desventajas de las terapiasexistentes surge la pregunta que seresponder%u00e1 en esta revisi%u00f3n : %u00bfSe pueden modificar las c%u00e9lulas T a trav%u00e9sde CRISPR-Cas9 junto a vectores virales, enforma dependiente o independiente de latecnolog%u00eda CAR-T, con el objetivo deaumentar la eficacia de la inmunoterapiacontra el c%u00e1ncer? Para responder esta pregunta se plantea elsiguiente objetivo: Evaluar la evidencia cl%u00ednicaque respalda el uso de edici%u00f3n g%u00e9nicamediante CRISPR-Cas9 para mejorar oreemplazar la inmunoterapia CAR-T en eltratamiento del c%u00e1ncer.2. METODOLOG%u00cdA2.1. Pregunta de investigaci%u00f3n La pregunta fue formulada en base a laestrategia PICO, seg%u00fan la cual el Problema esque los pacientes se hacen resistentes a lasterapias de primera l%u00ednea, la Intervenci%u00f3n esque las c%u00e9lulas T son susceptibles de sermodificadas mediante la tecnolog%u00eda CRISPCas9 junto a vectores lentivirales. LasComparaciones corresponden a la formadependiente o independiente de la tecnolog%u00edaCAR-T, y los Outcomes son para aumentar laeficacia de la inmunoterapia contra el c%u00e1ncersin afectar la seguridad.