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Figura 6. Ensayo in vitro para estudiar la influencia del metabolismo sobre la hepatotoxicidad de fármacos. El ensayo compara la
toxicidad del fármaco en células HepG2 y en células Ad-HepG2 (modificadas con adenovirus para conferirles expresión de enzimas de
metabolización de fármacos). Efectos similares del fármaco sobre ambos tipos de células indican que la toxicidad no depende del
metabolismo del fármaco (A). Una toxicidad mayor sobre células Ad-HepG2 (efectos tóxicos a concentraciones más bajas del fármaco)
sugiere que se trata de un fármaco bioactivable (B). La mayor sensibilidad de las células HepG2 indica que el metabolismo contribuye a
la destoxificación (C).

Las células CYP-THLE han sido generadas mediante el hepatocito humano (48). Este modelo de “hepatocito
uso de vectores virales que se integran en el genoma de la artificial”, llamado así por su semejanza metabólica con
célula y permiten una sobreexpresión estable e individual los hepatocitos humanos, se ha mostrado muy eficaz para
de un único CYP. La evaluación de la toxicidad de un discriminar entre fármacos bioactivables (más tóxicos en
fármaco sobre una batería de células CYP-THLE células AdvCYP-HepG2 que en células HepG2 no
(CYP1A2-THLE, CYP3A4-THLE, etc) y sobre las células transfectadas) y no bioactivables (la misma toxicidad sobre
parentales THLE (que no expresan CYPs) es posible ambos tipos celulares).
estudiar la contribución del metabolismo mediado por cada
uno de los CYPs (51). Sin embargo, una limitación 5.4. Identificación de perfiles metabólicos con mayor
importante de las células CYP-THLE es que muestran una
expresión desequilibrada de los enzimas de riesgo de hepatotoxicidad
biotransformación, con niveles altos del CYP
sobreexpresado y presencia muy reducida o nula del resto Dada la variabilidad interindividual en la expresión de
de enzimas (otros CYPS y enzimas de conjugación). Esto enzimas hepáticos implicados en el metabolismo de
es debido a que los procedimientos utilizados para la fármacos, cada persona o grupo de población muestra una
generación de estas células no permiten la expresión capacidad metabólica característica y, en consecuencia,
controlada del CYP de interés ni la introducción de varios una susceptibilidad potencialmente única a la
transgenes, por lo que los niveles de actividad resultantes hepatotoxicidad. Es razonable suponer que los individuos
son con frecuencia muy diferentes a los de los hepatocitos con un fenotipo metabólico que tiene como resultado un
humanos (52). aumento en la generación de metabolitos reactivos a partir
de un fármaco dado mostrarán un riesgo aumentado de
Como alternativa, se ha propuesto el uso de vectores hepatotoxicidad inducida por ese fármaco; mientras que
adenovirales para la obtención de células HepG2 con aquellos pacientes con un metabolismo acelerado de
capacidad metabólica adecuada para estudios de inactivación serán menos sensibles al fármaco. La
hepatotoxicidad (48,52). Los adenovirus recombinantes disponibilidad de estrategias in vitro capaces de imitar
permiten la introducción eficaz y controlada de genes de diferentes fenotipos metabólicos característicos del hígado
interés en células hepáticas, si bien la expresión es humano sería de utilidad indudable para anticipar el daño
transitoria y se debe realizar una nueva transfección para tóxico asociado a la idiosincrasia metabólica y mejorar con
cada experimento. Una gran ventaja de esta estrategia es ello la predicción de la hepatotoxicidad.
que se pueden generar con facilidad células que expresan
simultáneamente varios enzimas y, además, es posible La transducción mediada por adenovirus es un
seleccionar el nivel de actividad enzimática que se desea procedimiento simple, versátil y altamente reproducible
obtener (33,53). Utilizando este procedimiento se han para obtener células que co-expresan los niveles deseados
generado con éxito células AdvCYP-HepG2 que co- de varias enzimas (33,48,54). Por lo tanto, la estrategia
expresan los cinco CYPs más importantes en el basada en el uso de diferentes combinaciones de
metabolismo hepático de fármacos (CYP1A2, CYP2C9, adenovirus abre la posibilidad de generar una variedad de
CYP2C19, CYP2D6, CYP3A4) a niveles similares al células que reproducen fenotipos metabólicos
individualizados de interés para estudios de
hepatotoxicidad (53). El estudio comparativo de los
efectos de un fármaco sobre una batería de células con

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