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VOL. 74 (2), 283-306, 2008 DESARROLLO, ANÁLISIS Y OPTIMIZACIÓN DE MODELOS...

FIGURA 3. Niveles de expresión del factor de transcripción HNF4a,
sus coactivadores PGC1a y SRC1, y diferentes isoformas del CYP P450
en hepatoma humano HepG2 y cultivo primario de hepatocitos. El RNA

total fue purificado de cultivos de hepatocitos de 24 horas (barras negras)
y de células de hepatoma humano HepG2 (barras blancas). Los niveles específicos

de mRNA de los diferentes factores de transcripción e isoformas del CYP P450
se determinaron por RT-PCR cuantitativa a tiempo real. Los valores se expresan
como niveles de mRNA relativos a hígado humano y fueron normalizados respecto
al nivel de expresión (mRNA) del gen hPBGD. Las barras representan las medias

± SD (n = 3). HNF4a, Hepatocyte nuclear factor-4 alpha; PGC1a, Peroxisome
proliferator activated receptor Gamma coactivator 1 alpha; hPBGD, human
porphobilinogen deaminase; CYP, citocromo P450.

hepáticos (albúmina, CYP3A4 y factores de transcripción abundantes
en hígado) y no hepáticos (THY1) (Figura 4). Los niveles de mRNA del
marcador mesenquimal THY1 descendieron drásticamente al finalizar
el proceso de diferenciación, aproximándose a los valores obtenidos
en hígado y HepG2 (Figura 4A). Por otra parte, examinamos la expre-
sión del factor de transcripción HNF4a y de su coactivador PGC1a.
Como muestra la Figura 4B, la expresión de ambos factores expe-
rimenta un incremento con el transcurso del proceso de diferencia-
ción, siendo más significativo el incremento observado en PGC1a. Los
marcadores hepáticos específicos se expresan paralelamente. Así los
niveles de CYP3A4, uno de los citocromos P450 más abundantes del
hígado, y la albúmina aumentaron superando incluso los niveles ob-
servados en el hepatoma humano HepG2 (Figura 4C, 4D). Durante el
proceso de diferenciación pudo apreciarse un significativo cambio
morfológico, pasando de formas fibroblásticas en estado indiferencia-

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