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BEATRIZ CUBELOS Y COLS. AN. R. ACAD. NAC. FARM.
FIGURA 4. Ensayo de «pull down». Extractos de células COS transfectadas con los
vectores de expresión para HA-Mint2 o HA-Mint3 fueron incubadas con GST (ca-
rril 1), con GST-GLYT1del-Ct (carril 2) o con GST-GLYT1-Ct (carril 3) durante una
hora. Posteriormente se añadieron 50 µl de glutatión agarosa durante una hora. La
proteína acomplejada a las bolas se separó por centrifugación y tras lavados exhaus-
tivos se analizó por electroforesis e inmunotransferencia. Como control de la eficien-
cia de transfección se analizaron en paralelo los lisados celulares correspondientes.
Una de las proteínas Mint, Mint-1, forma parte de un tricomplejo
formado por Mint/MALS/CASK que ha sido implicado en el trans-
porte polarizado de proteínas, en procesos de exocitosis de vesículas
sinápticas y en la formación de complejos estables entre proteínas
de andamiaje en las que participan dominios PDZ. Por este moti-
vo decidimos estudiar también la posible interacción de GLYT1 con
las distintas isoformas de MALS y con CASK. En el caso de MALS,
se realizaron transfecciones en células COS con el vector de expre-
sión de GLYT1 y los vectores de las diferentes isoformas de MALS.
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