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BEATRIZ CUBELOS Y COLS. AN. R. ACAD. NAC. FARM.
FIGURA 6. Co-inmunoprecipitación de miembros de la familia MALS con GLYT1.
Células COS fueron transfectadas con los vectores de expresión para HA-MALS1,
HA-MALS2, GLYT1 o GLYT1delCt (deleción en la secuencia —SRI del extremo Ct
de GLYT1—) como se indica en la figura. Posteriormente fueron lisadas e inmu-
noprecipitadas con anticuerpo anti-GLYT1. Los inmunoprecipitados se analizaron
por electroforesis e inmunofluorescencia con anticuerpos que reconocen el epíto-
po HA. Los carriles primero y segundo muestran los lisados, mientras que el ter-
cer y cuarto carril muestran las inmunoprecipitaciones. Las interacciones de HA-
MALS1 y HA-MALS2 con GLYT1 desaparecen cuando se enfrentan con GLYT1 del Ct.
Sin embargo, en el caso de CASK, que pertenece a la familia
MAGUK, no encontramos interacción directa, ya que cuando se
coexpresó con GLYT1 no pudimos inmunoprecipitarla con anti-
GLYT1. Para analizar la posible relevancia de la interacción de
GLYT1 con estas proteínas en tejido cerebral realizamos experimen-
tos de inmunoprecipitación en sinaptosomas derivados de cerebro
de rata. Dichos sinaptosomas fueron solubilizados en 0,5% de Triton
X-100, desechándose la parte insoluble e incubando la fracción so-
luble con anti-GLYT1. Los inmunoprecipitados se analizaron por
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